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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 急！急！急！跑胶没有条带，请问这是因为什么？
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黑西虾虾

新虫 (初入文坛)

[求助] 急！急！急！跑胶没有条带，请问这是因为什么？ 已有10人参与

我用的酶是ExTaq
体系（50微升）：酶                     0.5
                           引物1、引物2：各4
                          buffer：                5
                          dntp:                    5
                          水                           27.5
                          模板：                  4

这些条件是之前师姐做成功的，可是自己做就是条带没跑出来。请问这是为什么？中间那个环节可能出问题？
1是提取DNA不纯？
2是加药品浓度不够？
3我跑胶时哪里出的问题？

急！急！急！跑胶没有条带，请问这是因为什么？
1.png
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1楼 2015-05-08 17:08:51
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)
太粗糙，做好陰性，陽性對照，這樣比較好找原因。你可以考慮以下幾個因素:模板有沒有問題，引物，pcr程序是不是合適，主要退火溫度

[ 发自小木虫客户端 ]
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天道酬勤
17楼2015-05-11 22:51:32
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yingheqian

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-05-09 12:50:59
黑西虾虾: 金币+3 2015-05-10 18:15:28
不是胶的问题，是PCR扩增的问题，只能一个个排除。Buffer是含镁离子的吧。
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2楼2015-05-08 17:13:04
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-05-09 12:51:11
模板是否有用？引物是否有用？
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3楼2015-05-08 17:21:00
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浅语8905

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-05-09 12:51:19
黑西虾虾: 金币+2, ★有帮助 2015-05-10 18:13:26
虽然胶跑的不好，但觉得是在PCR这一环节有问题，排除找原因吧
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4楼2015-05-08 20:01:41
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