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黑西虾虾

新虫 (初入文坛)

[求助] 急!急!急!跑胶没有条带,请问这是因为什么? 已有10人参与

我用的酶是ExTaq
体系(50微升):酶                     0.5
                           引物1、引物2:各4
                          buffer:                5
                          dntp:                    5
                          水                           27.5
                          模板:                  4

这些条件是之前师姐做成功的,可是自己做就是条带没跑出来。请问这是为什么?中间那个环节可能出问题?
1是提取DNA不纯?
2是加药品浓度不够?
3我跑胶时哪里出的问题?

急!急!急!跑胶没有条带,请问这是因为什么?
1.png
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

太粗糙,做好陰性,陽性對照,這樣比較好找原因。你可以考慮以下幾個因素:模板有沒有問題,引物,pcr程序是不是合適,主要退火溫度

[ 发自小木虫客户端 ]
天道酬勤
17楼2015-05-11 22:51:32
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查看全部 19 个回答

yingheqian

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2015-05-09 12:50:59
黑西虾虾: 金币+3 2015-05-10 18:15:28
不是胶的问题,是PCR扩增的问题,只能一个个排除。Buffer是含镁离子的吧。
2楼2015-05-08 17:13:04
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2015-05-09 12:51:11
模板是否有用?引物是否有用?
3楼2015-05-08 17:21:00
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浅语8905

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2015-05-09 12:51:19
黑西虾虾: 金币+2, 有帮助 2015-05-10 18:13:26
虽然胶跑的不好,但觉得是在PCR这一环节有问题,排除找原因吧
4楼2015-05-08 20:01:41
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