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xiaomier

铁虫 (初入文坛)

[求助] 细胞周期四个时相的区分 已有1人参与

各位大侠,想请教一下,如何区分细胞周期的各个时相,通过光学显微镜的观察可以确定单个癌细胞的G1,S,G2期吗?侧重于单个细胞的周期时相区分~谢谢
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Jarel_liu

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xiaomier: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-05-09 16:30:39
可以试试Fucci探针,这个能在活细胞下通过荧光辨识细胞周期状态。https://www.lifetechnologies.com/cn/zh/home/life-science/cell-analysis/cell-viability-and-regulation/cell-cycle/live-cell-imaging-of-cell-cycle-and-division.html
2楼2015-05-05 15:21:21
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xiaomier

铁虫 (初入文坛)

您好,非常感谢您的回答,这个荧光试剂会不会对细胞周期产生一定的影响?如果采用荧光显微镜的话,用多少倍荧光观察较合适?还有就是在明场下观察S,G2感觉不是很明显,如果采用这种探针的话在荧光下一定可以分辨出来吗?非常感谢。
3楼2015-05-06 15:01:24
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Jarel_liu

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xiaomier at 2015-05-06 15:01:24
您好,非常感谢您的回答,这个荧光试剂会不会对细胞周期产生一定的影响?如果采用荧光显微镜的话,用多少倍荧光观察较合适?还有就是在明场下观察S,G2感觉不是很明显,如果采用这种探针的话在荧光下一定可以分辨出 ...

Fucci探针我也只是看过当时发表的文章原文,自己也没试过。有一些细胞成像的设备可以满足低光毒性要求的,一些活细胞工作站就具备这个能力。这是两个基因共表达的,20倍就能看到明显的颜色信号差异的,更高倍数的可以看得更准确些,但我觉得差不多40倍就能满足观察的需要了。这种探针不能很好地区分S期和G2期的细胞,它只能区分增殖和静止的细胞。不过按照文献的说法,用可以定量分析荧光强度的显微设备或许也能实现这些时期细胞的区分的。希望能对你有所帮助。
4楼2015-05-11 20:18:31
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xiaomier

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Jarel_liu at 2015-05-11 20:18:31
Fucci探针我也只是看过当时发表的文章原文,自己也没试过。有一些细胞成像的设备可以满足低光毒性要求的,一些活细胞工作站就具备这个能力。这是两个基因共表达的,20倍就能看到明显的颜色信号差异的,更高倍数的可 ...

非常有用,谢谢您的回答。
5楼2015-05-12 08:19:27
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