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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 定量PCR跑出来没有CT值，怎么回事
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)

[求助] 定量PCR跑出来没有CT值，怎么回事 已有4人参与

跑了两个样做标准曲线，跑完结果第一个样就没有检测到CT值，怎么回事？两个样品就引物不一样，其他都一样啊。刚接触定量PCR，求教
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天道酬勤
1楼 2015-05-03 13:38:08
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shanxw

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
随风飘摇11: 金币+1, ★★★很有帮助, 已解决，谢谢 2015-05-07 12:00:08
如果引物没问题，操作条件也没为题的话，个人觉得应该是样本模板浓度太低了  ，我也做过没有出现CT值的结果调整模板浓度就可以了  你可以试试
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11楼2015-05-07 11:36:37
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
随风飘摇11: 金币+2, ★有帮助 2015-05-03 18:13:24
首先你要确认你的这对引物是否适合在你这个反映程序中扩增，可用凝胶电泳检测引物的特异性、退火温度等等。如果引物合适，再确认这个探针是否在所测样品中有表达，如果本身就没有表达或者表达量极低，也是无法检测的。祝好运。
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2楼2015-05-03 15:53:10
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-05-03 15:53:10
首先你要确认你的这对引物是否适合在你这个反映程序中扩增，可用凝胶电泳检测引物的特异性、退火温度等等。如果引物合适，再确认这个探针是否在所测样品中有表达，如果本身就没有表达或者表达量极低，也是无法检测的 ...

怎么检测引物是否合适？定量的引物也可能用来做普通的PCR扩增吗？

[ 发自小木虫客户端 ]
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天道酬勤
3楼2015-05-03 18:13:10
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晞朔

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2015-05-03 18:13:10
怎么检测引物是否合适？定量的引物也可能用来做普通的PCR扩增吗？
...

可以。用凝胶电泳就可以
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4楼2015-05-03 18:14:53
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