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hqj200808

铜虫 (小有名气)

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[求助] 硅胶柱层析相关问题已有4人参与

1，大家做硅胶柱层析纯化时，装好的柱子是重复利用么？还是一次性的。感觉每次能纯化的物质非常的少，要是每次都重新装柱特别麻烦，但是若不重新装，要把所有的东西都洗脱下来耗费大量洗脱剂，而去一般最后的洗脱剂极性都是非常大的，是否把所有东西都洗脱下来后还要用初始洗脱剂进行洗脱（这样才不改变柱子最初的极性）。
2，这样的柱子是不是说明拖尾比较严重呀？要怎么办才好呢

柱色谱20150501.jpg

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1楼2015-05-02 18:06:05

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huangdonghai

木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
hqj200808: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-05-03 12:46:28

首先纠正一个误区，硅胶是可以回收利用的，但实验室没有回收的条件，所以一般直接一次性，然后扔掉。就算回收，绝不是楼主那么回收的，你用大极性溶剂洗脱过后，溶剂就会被吸附到硅胶上面，用小极性的是不能置换大极性的溶剂的，所以你那种回收的方法是绝对不行的，你那种方法就算能用，也不再是吸附色谱了，有可能变成液液分配色谱了。
其次，柱子上面肉眼能见的色带只能作为参考，还是要小体积接收，然后薄层层析确定合并，严格的讲，薄层层析后，在254下面看了还要显色剂显色再看，之后才能合并。
最后，我看到有层主在谈高径比的问题，小柱子可以看看，作为参考，但大柱子就不要管高径比了。我装过直径20㎝、高20㎝的，也装过直径10㎝、高200㎝的，还装过直径5㎝、高30——50㎝的，装柱主要看硅胶的粒度和分离材料的薄层行为。

[ 发自小木虫客户端 ]