| 查看: 1550 | 回复: 4 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
关于cas9敲除的问题
|
|||
|
cas9靶位点可以设计成21个碱基吗，我们实验室准备用T7启动子，5‘端两个G，3’端结束后是NGG。看了网上和文献上大部分靶位点都是设计成20个碱基，但是也有说19到23个碱基都可以。20个碱基实在找不到靶点了，21个碱基的靶点还能找到一个，不知道能不能用。 大家对cas9有什么看法和经验都可以交流一下，据说脱靶效应很严重啊 |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有240人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 不可应用微生物来解决的实际问题
已经有11人回复
- 求助基因沉默的问题 谢谢
已经有3人回复
- crispr/cas9 介导在mouse neuro 2a(n2a) cell line 中的敲除
已经有4人回复
- 关于crispr/cas9敲除试剂盒 知道的请进洒
已经有8人回复
- CAS : 1219720-27-0
已经有5人回复
- 基因敲除、互补、功能研究等实验怎么做？
已经有57人回复
- Crispr/Cas9 基因敲除：有限稀释法（单克隆挑选）
已经有70人回复
- Crispr/Cas9 在植物系统中的应用（基因敲除或者定点整合）
已经有23人回复
- 能不能利用细菌CRISPR/cas9系统敲除自身的基因？
已经有11人回复
- 哪里能弄到用于植物基因敲除的cas9质粒
已经有9人回复
- 【求助/交流】关于基因敲除的方法
已经有18人回复
sibei1
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 116.9
- 散金: 5
- 帖子: 59
- 在线: 23.4小时
- 虫号: 4568405
- 注册: 2016-04-05
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
问题1:gRNA长度18-22吧，大致范围，有专门文献的，你看一下。这东西类似引物，没必要非得20。至于为什么文献大都是20bp，是因为最开始在酿脓杆菌发现的是20个，最早发现所以最多使用而已，你完全可以改变长度的。有的网站设计的可以不是20.第二个问题：G可加可不加，张峰实验室推荐加，因为真核细胞启动子转录起始位点为G，但是很多实验发现不加或开头不是G不影响打靶效率。 发自小木虫Android客户端 |
4楼2016-04-27 04:06:09
2楼2015-06-03 16:23:30
高山流水循
木虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 2247.3
- 散金: 90
- 红花: 1
- 帖子: 258
- 在线: 88.1小时
- 虫号: 2140879
- 注册: 2012-11-22
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传学
3楼2016-04-10 10:40:41
5楼2016-04-27 06:32:57
