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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 关于蔗糖密度梯度离心之后
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lshunji

铁虫 (小有名气)

[求助] 关于蔗糖密度梯度离心之后

请问各位大神：
我是需要得到病毒的纯化DNA，我的想法是这样的：首先从昆虫体内提取血淋巴（我确定病毒在血淋巴中），用超震声波法包含病毒粒的囊泡震碎，然后使用蔗糖密度梯度离心发提取纯化的病毒粒，那么问题来了，提取了纯化的病毒粒之后，如何获得病毒基因组DNA？？直接通过萃取还是怎么样？？跪求具体步骤了。。。如果可以麻烦附上文献。。。
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1楼 2015-04-28 21:30:41
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酒家何处

新虫 (小有名气)
病毒一般需要富集。加裂解液直接过吸附柱。或者异丙醇沉淀。乙醇洗涤

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2015-04-28 22:29:49
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lshunji

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 酒家何处 at 2015-04-28 22:29:49
病毒一般需要富集。加裂解液直接过吸附柱。或者异丙醇沉淀。乙醇洗涤

呃 请问可以说的更详细点吗 最好是把每个步骤都写出来 可以吗？？
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3楼2015-04-29 09:11:56
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Zxiangyang

新虫 (初入文坛)
如果你只要基因组的话可以直接从病料里面提取，用试剂盒就行，不需要纯化病毒，这个我做过。
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4楼2015-09-03 21:44:29
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ssswzf

金虫 (小有名气)
病毒颗粒提纯之后，试试蛋白酶K和SDS裂解，一般情况下都会释放DNA的，只不过就是多少的问题了，剩下的就是吸附核酸了，通常就是硅羟基特异吸附，然后解离！希望对你有帮助，Q 619857031，相互学习，共同进步
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5楼2015-11-27 22:17:41
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