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如果木南

新虫 (正式写手)

[求助] 肌球蛋白凝胶 已有2人参与

有没有做肌球蛋白凝胶的啊,为什么我配制的肌球蛋白溶液在加热后无法形成凝胶呢
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xiaoamuchong

专家顾问 (职业作家)

科研工作者

我们又不是一起做的咯。。温度pH什么的都要写出来吖。。
曾经有人问我为什么要学微生物,我只是想离生命的本质更近一点。
2楼2015-04-23 16:35:00
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如果木南

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaoamuchong at 2015-04-23 16:35:00
我们又不是一起做的咯。。温度pH什么的都要写出来吖。。

呵呵,忘了,嘿嘿
3楼2015-04-23 16:48:16
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如果木南

新虫 (正式写手)

实验步骤如下:1、肌球蛋白的制备
新鲜绞碎的鱼肉中加入 5 倍(m/v)含有50mmol/LNaCl 的 20mmol/L 磷酸盐缓冲液(pH6.8),匀浆,5000×g,4℃条件下离心15min 弃去上清液,按上述步骤重复操作 2 次。收集的沉淀加入 10 倍(m/v)0.6mol/LNaCl,溶液(pH7.0),匀浆,10,000×g,离心 10min(4℃),上清液用尼龙网过滤去除结缔组织后加入 3 倍体积的冷蒸馏水稀释蛋白溶液使肌动球蛋白沉淀,然后 10,000×g,离心20min(4℃)收集肌动球蛋白沉淀。
2、肌球蛋白凝胶的制备
将上述提取出的肌球蛋白及配制成2%、4%的蛋白溶液水浴加热至90℃,保温10min
但是无法形成凝胶,只是产生了一些蛋白聚集物
4楼2015-04-23 17:03:04
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双双麦香

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


如果木南(sytucom代发): 金币+1, 感谢应助,希望继续关注楼主回复,谢谢 2015-08-22 23:50:40
引用回帖:
4楼: Originally posted by 如果木南 at 2015-04-23 17:03:04
实验步骤如下:1、肌球蛋白的制备
新鲜绞碎的鱼肉中加入 5 倍(m/v)含有50mmol/LNaCl 的 20mmol/L 磷酸盐缓冲液(pH6.8),匀浆,5000×g,4℃条件下离心15min 弃去上清液,按上述步骤重复操作 2 次。收集的沉淀加 ...

测测ph值,蛋白一般在中性或碱性条件下形成凝胶

[ 发自小木虫客户端 ]
Happy,isthemostimpotantthing!
5楼2015-04-27 21:16:31
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天狼2013

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 双双麦香 at 2015-04-27 21:16:31
测测ph值,蛋白一般在中性或碱性条件下形成凝胶
...

中性或碱性下加热形成热凝胶,酸性下等电点形成冷凝胶。
6楼2015-04-28 09:48:17
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天狼2013

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 如果木南 at 2015-04-23 17:03:04
实验步骤如下:1、肌球蛋白的制备
新鲜绞碎的鱼肉中加入 5 倍(m/v)含有50mmol/LNaCl 的 20mmol/L 磷酸盐缓冲液(pH6.8),匀浆,5000×g,4℃条件下离心15min 弃去上清液,按上述步骤重复操作 2 次。收集的沉淀加 ...

蛋白浓度太低了?如果不能形成凝胶,可加入凝固剂,氯化钙啥的。
7楼2015-04-28 09:50:01
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pan1576

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


如果木南(sytucom代发): 金币+1, 感谢应助,希望继续关注楼主回复,谢谢 2015-08-22 23:50:52
应该是没加盐的原因吧,加了多少盐进去?
8楼2015-07-14 19:42:44
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