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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 人工MICRORNA 干扰表达载体的构建
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jxtp111524

金虫 (小有名气)

[求助] 人工MICRORNA 干扰表达载体的构建

用快切酶切的 切胶回收的核酸浓度还可以，我觉得是插入片段和载体片段的摩尔比没有合适，插入片段512bp,载体片段12953bp.      表 达载体连接不上有时候不出白斑 有时候出白斑 挑菌 菌液PCR 连空载体 1200片段都没有  我设计引物 是空载载体是1200bp 片段 连上目的片段是 1712 bp . 问题是白斑菌液PCR连 1200片段都没有 片段切胶回收浓度 12 纳克/微升  载体是 16.5  纳克/微升
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努力加油
1楼 2015-04-23 11:35:06
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jxtp111524

金虫 (小有名气)
我用的摩尔比 片段比载体 3比1  10比1  5比1 6比1 都用了 还是不行 TRANSGEN 连接酶试剂盒
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努力加油
2楼2015-04-23 11:57:16
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