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方天或

铜虫 (小有名气)

[求助] 液相问题已有6人参与

生物样本,10000转离心取上清。共91个样,前20个样峰型都还好,之后 主药峰出现了分裂,就是双峰或者峰前出现一个小包。流动像是 79%PH=4的磷酸二氢钠缓冲液和21%的乙腈。碳8柱。
会是什么原因导致呀?以前没有出现过这样的情况,求大神帮忙分析。
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分析检测仪器达人
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奋斗_小青年

铁杆木虫 (正式写手)

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★ ★ ★ ★ ★
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方天或: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 昨天下午冲了一下午的乙腈,晚上再测果然 前30个ok,后面又完了,但是样品比较多该怎么弄呢? 2015-04-23 08:44:15
柱子明显受污染了,特别是磷酸缓冲液的流动相更得注意!
用乙腈或甲醇冲洗个半天,估计就正常了。
祝好
7楼2015-04-22 18:01:01
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dcmyt

金虫 (小有名气)

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感谢参与,应助指数 +1
有可能是PEG400造成的,开始进样可能影响比较小,慢慢的就对色谱柱有损坏,建议减小进样量试试~

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8楼2015-04-22 18:47:11
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lliqi

金虫 (初入文坛)

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应该是柱子脏了,冲洗下柱子

[ 发自小木虫客户端 ]
本命年
9楼2015-04-22 18:53:22
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dancinggirl

木虫 (小有名气)

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★ ★
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方天或: 金币+2, ★★★很有帮助, 仔细再跟我说说吧 2015-04-22 16:26:44
你的稀释剂是什么?如果稀释剂的不是流动相且稀释剂洗脱能力大于流动相时,容易出现主峰前出现大包或分叉。建议更改稀释剂为流动相或者乙腈比例低于流动相试试
2楼2015-04-22 11:30:41
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duliuhui

金虫 (正式写手)

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★ ★
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方天或: 金币+2, 有帮助, 谢谢回复 2015-04-22 16:27:00
可能柱子不行了,换个其他柱子同条件试试。
确定是柱子问题后再尝试能否活化恢复过来。
3楼2015-04-22 13:23:48
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方天或

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dancinggirl at 2015-04-22 11:30:41
你的稀释剂是什么?如果稀释剂的不是流动相且稀释剂洗脱能力大于流动相时,容易出现主峰前出现大包或分叉。建议更改稀释剂为流动相或者乙腈比例低于流动相试试

做的是经皮扩散实验。。。接受液是20%的PEG400的生理盐水溶液。然后直接离心取上清
分析检测仪器达人
4楼2015-04-22 16:24:11
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mxx7456

新虫 (小有名气)

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方天或: 金币+1, 有帮助 2015-04-22 16:59:18
将前面木有问题的样品再进一遍,排除样品不稳定的情况。
5楼2015-04-22 16:51:35
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方天或

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by mxx7456 at 2015-04-22 16:51:35
将前面木有问题的样品再进一遍,排除样品不稳定的情况。

一样的。。。因为前面有标准品 每隔20个样 标准会重新再进一次,开始的两个标准峰型ok 后面的也出现这样的状况。
分析检测仪器达人
6楼2015-04-22 16:59:10
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dancinggirl

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 方天或 at 2015-04-22 16:24:11
做的是经皮扩散实验。。。接受液是20%的PEG400的生理盐水溶液。然后直接离心取上清...

前面出峰正常的样品进样量与出现问题的进样量是否一致?会不会是过载?
10楼2015-04-22 18:57:15
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