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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 资料求助 » 液相问题
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方天或

铜虫 (小有名气)

[求助] 液相问题 已有6人参与

生物样本，10000转离心取上清。共91个样，前20个样峰型都还好，之后 主药峰出现了分裂，就是双峰或者峰前出现一个小包。流动像是 79%PH=4的磷酸二氢钠缓冲液和21%的乙腈。碳8柱。
会是什么原因导致呀？以前没有出现过这样的情况，求大神帮忙分析。
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分析检测仪器达人
1楼 2015-04-22 11:26:59
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

奋斗_小青年

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
方天或: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 昨天下午冲了一下午的乙腈，晚上再测果然 前30个ok，后面又完了，但是样品比较多该怎么弄呢？ 2015-04-23 08:44:15
柱子明显受污染了，特别是磷酸缓冲液的流动相更得注意！
用乙腈或甲醇冲洗个半天，估计就正常了。
祝好
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7楼2015-04-22 18:01:01
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dcmyt

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有可能是PEG400造成的，开始进样可能影响比较小，慢慢的就对色谱柱有损坏，建议减小进样量试试~
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

方天或
8楼2015-04-22 18:47:11
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lliqi

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该是柱子脏了，冲洗下柱子

[ 发自小木虫客户端 ]
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本命年
9楼2015-04-22 18:53:22
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普通回帖

dancinggirl

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
方天或: 金币+2, ★★★很有帮助, 仔细再跟我说说吧 2015-04-22 16:26:44
你的稀释剂是什么？如果稀释剂的不是流动相且稀释剂洗脱能力大于流动相时，容易出现主峰前出现大包或分叉。建议更改稀释剂为流动相或者乙腈比例低于流动相试试
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2楼2015-04-22 11:30:41
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duliuhui

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
方天或: 金币+2, ★有帮助, 谢谢回复 2015-04-22 16:27:00
可能柱子不行了，换个其他柱子同条件试试。
确定是柱子问题后再尝试能否活化恢复过来。
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3楼2015-04-22 13:23:48
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方天或

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dancinggirl at 2015-04-22 11:30:41
你的稀释剂是什么？如果稀释剂的不是流动相且稀释剂洗脱能力大于流动相时，容易出现主峰前出现大包或分叉。建议更改稀释剂为流动相或者乙腈比例低于流动相试试

做的是经皮扩散实验。。。接受液是20%的PEG400的生理盐水溶液。然后直接离心取上清
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分析检测仪器达人
4楼2015-04-22 16:24:11
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mxx7456

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
方天或: 金币+1, ★有帮助 2015-04-22 16:59:18
将前面木有问题的样品再进一遍，排除样品不稳定的情况。
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5楼2015-04-22 16:51:35
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方天或

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by mxx7456 at 2015-04-22 16:51:35
将前面木有问题的样品再进一遍，排除样品不稳定的情况。

一样的。。。因为前面有标准品 每隔20个样 标准会重新再进一次，开始的两个标准峰型ok 后面的也出现这样的状况。
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分析检测仪器达人
6楼2015-04-22 16:59:10
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dancinggirl

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 方天或 at 2015-04-22 16:24:11
做的是经皮扩散实验。。。接受液是20%的PEG400的生理盐水溶液。然后直接离心取上清...

前面出峰正常的样品进样量与出现问题的进样量是否一致？会不会是过载？
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10楼2015-04-22 18:57:15
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