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myshl1989

金虫 (初入文坛)

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虫号: 1517783
注册: 2011-11-30
性别: GG
专业: 血液、泌尿与生殖系统药物

[求助] 有必要用FPLC么？已有1人参与

请教下各位虫友，我找外包公司表达一个酶原，随后再激活成酶（文献上这个步骤，直接表达酶怕没有活性）。他现在跟我说，先纯化酶原，激活后再纯化相应的酶，必须用到FPLC的纯化工作站（AKATA），因为激活后的酶原就丢掉了标签蛋白，所以还要加钱，有这样的必要么？

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1楼 2015-04-22 09:06:49

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myshl1989

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引用回帖:

2楼: Originally posted by pennchem at 2015-04-22 10:17:38
问的问题有点不清晰，是不是如果不用FPLC就便宜一点，因为有tag可以用来亲和层析？

如果激活后，tag就随之切掉了，要重新纯化，必须用FPLC, 价格就贵了？

用FPLC纯化肯定重复性，可控性要好，如果用于体外实验 ...

你好，是你表达的意思，我下游想做蛋白质结合的实验。尽量不用FPLC，但怕亲和层析后没活性