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长风892

木虫 (著名写手)

[交流] 向高手请教——琼脂糖DNA电泳结果分析

我最近跑了琼脂糖DNA电泳,结果不甚理想,但又分析不出是什么原因,请

教了很多人,还是不明白什么原因。请哪位高手指点下,万分感谢!!!

    实验结果请见附件照片,从左到右依次为MARK,阴性组,低剂量组和两个

高剂量组。MARK颜色较浅,阴性组和低剂量组拖尾较严重,两个高剂量组则无

明显拖尾现象(注:药物对肿瘤细胞具有较强的抑制作用)。
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

提DNA的话,Tiangen应该不至于那么烂
是不是你提取的时候吹打还有晃动太严重了?
提DNA的时候千万别吹打试剂混匀,我都是悬空滴加试剂
混匀是颠转混匀的,或者用手指轻弹管壁
如果DNA被切断了,确实很容易拖尾

我的胶是25ml的那种小胶(绝对够的),0.8%
电泳时间的话,100V估计跑个40~45min都可以了
缓冲液是0.5X的TBE
9楼2008-07-08 11:00:49
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xujian568

至尊木虫 (著名写手)

Count XU

有可能是样品浓度问题,也就是上样的量。再者提的质量好像不太好。胶的浓度是多少,有没有配错?电流是多少?可能太高了。还有就是缓冲液,是不是该换了。你用什么染色的?EB or goldview?时间是多少,如果是直接加在胶里,调整下浓度。你分析下,换着试试。
活着就要让人感受到你的存在。
2楼2008-07-08 09:44:49
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

是加药之后直接提total DNA然后跑胶吗?
3楼2008-07-08 10:24:24
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长风892

木虫 (著名写手)

用的是试剂盒提的,胶浓度为1.5%,电压60V,电流18MA,电泳2.5H结束,EB染色10分钟,上样量为15UL,请问这与电流大小有关吗?一般常用电流是多少?为什么高剂量没出现拖尾呢?
4楼2008-07-08 10:26:14
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