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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 向高手请教——琼脂糖DNA电泳结果分析
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长风892

木虫 (著名写手)

[交流] 向高手请教——琼脂糖DNA电泳结果分析

我最近跑了琼脂糖DNA电泳，结果不甚理想，但又分析不出是什么原因，请

教了很多人，还是不明白什么原因。请哪位高手指点下，万分感谢！！！

    实验结果请见附件照片，从左到右依次为MARK，阴性组，低剂量组和两个

高剂量组。MARK颜色较浅，阴性组和低剂量组拖尾较严重，两个高剂量组则无

明显拖尾现象（注：药物对肿瘤细胞具有较强的抑制作用）。
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1楼 2008-07-07 21:05:03
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长风892

木虫 (著名写手)
用的是试剂盒提的，胶浓度为1.5％，电压60V，电流18MA，电泳2.5H结束，EB染色10分钟，上样量为15UL，请问这与电流大小有关吗？一般常用电流是多少？为什么高剂量没出现拖尾呢？
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4楼2008-07-08 10:26:14
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xujian568

至尊木虫 (著名写手)

Count XU
有可能是样品浓度问题，也就是上样的量。再者提的质量好像不太好。胶的浓度是多少，有没有配错？电流是多少？可能太高了。还有就是缓冲液，是不是该换了。你用什么染色的？EB or goldview?时间是多少，如果是直接加在胶里，调整下浓度。你分析下，换着试试。
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活着就要让人感受到你的存在。
2楼2008-07-08 09:44:49
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
是加药之后直接提total DNA然后跑胶吗？
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3楼2008-07-08 10:24:24
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
这样子的，total DNA一般推荐0.3%的胶，但我一般用0.8%的胶，图更加漂亮，更浓的胶就很难跑。如果电泳时间过长，胶发热了，DNA很容易降解。就会有很严重的拖尾。
电压用100V~120V，当二甲苯青跑到1/3左右就可以停（短的小胶）
上样一般取5ul，不过看你的DNA的含量。你上了15ul还是这么淡，很奇怪，浓度太低了吧。

我用过Invitrogen和QIAGEN的盒子来提，效果都不错
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5楼2008-07-08 10:31:30
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