24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 1144  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zy-2014

木虫 (小有名气)

[求助] 质粒抽提 已有1人参与

各位师兄师姐,你们好!
    我接的前人师兄的课题,菌(DH5α)已经保存了将近3年了,一直保存在-80℃里,中途为未活化过,现在我活化了,在50ug/ml的Ampr上4天以后长出了一堆菌,观察其菌落形态,应该是细菌,我就划单菌落了,始终没有长出单菌落,我没办法,只好把这一堆菌接种于1ml的种子培养液中培养了24h,见离心管中LB培养基浑浊以后,再将其接种于50ml的LB中培养36h,然后用Promege的10T质粒提取试剂盒抽取质粒,但电泳检测以后,没有条带,只有一条类似于瀑布状的散带,点样孔还亮着,好像是蛋白质污染了,总之是没有提出来质粒。我是分子生物学的小喽喽,希望各位大神能够帮我分析分析,给出您们的意见和建议,谢谢您们!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

浅语8905

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by zy-2014 at 2015-04-23 15:19:57
谢谢您……您觉得我的下一步应该怎么做呢?的确我的菌就长了快四天才长出来的……谢谢您……...

先接在LB液体培养基中试试,看看长不长,如果长的话就可以划线看看
8楼2015-04-23 17:43:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

feng37ye

新虫 (初入文坛)

没有见到电泳图,单看描述推断,有可能提出质粒了,不过拖尾严重,蛋白等杂志未去除干净。建议看一下solusion I 和 II 是否失效,还有操作非常重要,时间也要掌握好。能养出单菌落最好还是从单菌落阔培

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2015-04-21 16:54:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

浅语8905

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zy-2014: 金币+20, ★★★很有帮助, 谢谢您,希望我有难题了你还是可以给我解惑,真心谢谢您…… 2015-04-23 15:38:10
首先,培养那么长时间,抗性早已失效,无法保证是不是杂菌,其次,大肠一般培养12小时应该就会长好,除非是质粒的问题。
3楼2015-04-21 20:34:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zy-2014

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by feng37ye at 2015-04-21 16:54:28
没有见到电泳图,单看描述推断,有可能提出质粒了,不过拖尾严重,蛋白等杂志未去除干净。建议看一下solusion I 和 II 是否失效,还有操作非常重要,时间也要掌握好。能养出单菌落最好还是从单菌落阔培
...

谢谢您……
4楼2015-04-23 15:18:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 药学305求调剂 +6 玛卡巴卡boom 2026-04-11 6/300 2026-04-14 19:48 by zhouxiaoyu
[考研] 求助调剂,跨调 +18 X十甫寸Y 2026-04-11 19/950 2026-04-14 19:26 by Art1977
[考研] 调剂 +12 月@163.com 2026-04-11 12/600 2026-04-14 15:37 by zs92450
[考研] 一志愿沪9,326求生物学调剂 +10 刘墨墨 2026-04-13 10/500 2026-04-14 15:16 by zs92450
[考研] 考研英一数一338分 +9 长江大学东校区 2026-04-13 10/500 2026-04-14 00:41 by 王珺璞
[考研] 2026硕士调剂_能动_河南农业大学 +4 河南农业大学-能 2026-04-12 4/200 2026-04-13 22:01 by bljnqdcc
[考研] 297工科,求调剂? +13 河南农业大学-能 2026-04-12 13/650 2026-04-13 14:12 by dingyanbo1
[考研] 一志愿085802 323分求调剂 +13 drizzle_9 2026-04-12 14/700 2026-04-13 10:26 by Faiz5552
[考研] 一志愿0807 数一英一 313 有没有二轮调剂 +12 emokidd 2026-04-08 13/650 2026-04-13 08:32 by lhj2009
[考研] 2本,初试303,0860求调剂 +6 floriea 2026-04-12 8/400 2026-04-12 18:13 by zhouxiaoyu
[考研] 本科南方医科大学 一志愿985 药学学硕284分 求调剂 +5 弱水听文 2026-04-09 5/250 2026-04-12 13:16 by shengxi123
[考研] 电气专硕320求调剂 +6 小麻子111 2026-04-10 6/300 2026-04-12 10:54 by lemon6009
[考研] 070300化学279求调剂 +19 哈哈哈^_^ 2026-04-08 20/1000 2026-04-11 20:43 by stoner78
[考研] 电子信息279求调剂,有书读就行 +8 wwwooden 2026-04-08 11/550 2026-04-11 20:22 by cq2548
[考研] 270求调剂 +14 杨乐369 2026-04-11 14/700 2026-04-11 20:16 by 蓝云思雨
[考研] 22408 327分求调剂 +4 韵风kon 2026-04-10 4/200 2026-04-11 09:51 by 猪会飞
[考研] 一志愿北理工298英一数二已上岸,感谢各位老师 +14 Reframe 2026-04-10 16/800 2026-04-10 23:07 by caotw2020
[考研] 263能源动力专硕求调剂 +3 加大号饭盒袋 2026-04-10 3/150 2026-04-10 22:23 by 286640313
[考研] 机械专368 有去处吗 +4 种大树 2026-04-10 4/200 2026-04-10 15:31 by jiajinhpu
[考研] 材料专硕初试分332一志愿西北工业大学, +12 故人?? 2026-04-09 12/600 2026-04-09 18:34 by Ccclqqq
信息提示
请填处理意见