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waiting6830铜虫 (小有名气)
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为什么PAGE电泳银染后条带较宽且拖尾 已有2人参与
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样品为sigma的酶，开始时用10%和12%分离胶，marker条带跑不全，所以换成15%分离胶。用考马斯亮蓝染色，样品颜色较浅，所以用银染，买的银染试剂盒。具体条件如下： 分离胶15% 浓缩胶3% 上样量10微升 分离胶110mV 浓缩胶70mV 电泳结果如图，左右条带为marker，中间为样品，从左到右浓度依次降低。现在问题是： 1、条带宽，还拖尾，marker倾斜，为什么？调整分离胶浓度会不会好些？怎么做条带才好看？ 2、考马斯亮蓝染色时样品只有一个条带出现，对应在marker第四个条带下方，而银染后出现很多条带，且对应marker第三个条带颜色与第四个同样深，为什么？是不是因为这个酶本来就不纯，含有一些浓度较低的蛋白杂质？还是因为上样时，样品被marker污染了？还是酶蛋白降解了？  IMG_20150410_174320_BURST1.jpg |
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