24小时热门版块排行榜    

查看: 2544  |  回复: 2
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

gnijuhz

新虫 (初入文坛)

[求助] FISH 结果荧光信号不强,跪求如何优化FISH条件,拍出漂亮图片 已有2人参与

近期在做FISH,但是实验结果均存在荧光信号不强的问题。求:如何调整实验条件,优化实验结果?

杂交对象:生物膜样品
探针个数:3;分别用Cy3,Cy5和FITC标记,其中Cy3信号较强,其他两个较弱
杂交液成分:FA浓度35%(三种探针FA浓度不同,根据文献认为35%较合适),NaCl 浓度 5M,Tris/HCl (pH 8.0) 1M,SDS 10%(w/v)
杂交条件:46℃ 2-3h

杂交时间是否越长越好?
FISH 结果荧光信号不强,跪求如何优化FISH条件,拍出漂亮图片
Image131.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (小有名气)

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-04-21 08:37:05
本帖仅楼主可见
3楼2015-04-21 01:58:27
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页
查看全部 3 个回答

wangranchd

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-04-21 08:37:02
采用激光共聚焦显微镜拍照时,如果信号不强,可以加大进光的激光强度。
并不是杂交的时间越长越好,我们实验室要求控制在30min-1h,时间过长会导致其他非特征细菌也会荧光显色。
荧光效果很大程度上决定于你所购买的探针质量!
2楼2015-04-20 20:25:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 14/700 2026-08-21 16:51 by applepetty
[基金申请] 让我中一个面上吧! +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +23 yaoyewhu2008 2026-08-20 25/1250 2026-08-21 12:19 by Poppy1104
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
请填处理意见