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布丁小布点

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教用紫外分光光度法测污泥中PHB(聚β-羟基丁酸酯) 已有1人参与

看了好多天文献,也看晕了,整理了一下检测步骤,各位大神看看按照这个过程测可以吗?
        (1) 取10mL污泥混合液,离心(4000r/min,15min),弃去上清液
        (2) 将沉淀用纯水洗涤,离心(4000r/min,10min),弃去上清液;重复三次
        (3) 将所得沉淀转移到150mL锥形瓶中,60℃条件下烘干,干燥皿中冷却
        (4) 加入5mL NaClO溶液和10mL氯仿,充分混合后密封,置于水浴恒温振荡器中,在(150 r/min,37℃)条件下震荡萃取90min。
        (5) 将萃取液转移到50mL离心管中,离心(4000r/min,10min)
        (6) 从下层氯仿相中吸取2mL溶液,加入到10mL的消解管中,放入消解仪中,于100℃下加热蒸发掉氯仿
        (7) 冷却后,向消解管中加入5mL浓H2SO4,加盖密封,于100℃消解10min。
        (8) 取出放冷,用纯水稀释10倍,在235nm处测定其吸光度。
        (9) 取与样品分析同体积的氯仿,用硫酸处理,做空白分析
        (10) 分取0、1、2、3、5、8、10、12、14、16mg/L的PHB标准样品,相同条件处理后做标线。

另外还有几点疑问
a) 蒸发掉氯仿大概用多长时间? 是要到消解管中没有液体存在才算蒸干吗?
b) 在测量吸光度时,用多大规格的比色皿?10mm?20mm?
c) 最后一个问题,我在南京,大家都是在哪家公司买PHB标准品的?
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chenccccc

新虫 (初入文坛)

好巧,我也有这几个问题想问,我也在南京,打算在sigma公司的上海供应商那买,请问你最后到底是怎么做的,测的效果怎么样
9楼2017-04-11 11:39:46
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查看全部 11 个回答

haozii

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
布丁小布点: 金币+2 2015-04-18 07:34:16
我怎么记得是不用把氯仿蒸发掉的,氯仿作为溶解PHB的溶剂,在反应过程中应该必须存在的吧(我只做过几次PHB分析,用的GC-MS,勉强测到一点点)
喵~o( =∩ω∩= )m
2楼2015-04-17 14:38:55
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布丁小布点

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by haozii at 2015-04-17 14:38:55
我怎么记得是不用把氯仿蒸发掉的,氯仿作为溶解PHB的溶剂,在反应过程中应该必须存在的吧(我只做过几次PHB分析,用的GC-MS,勉强测到一点点)

哦…谢谢~请问 标准品在哪买的?

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-04-18 07:33:59
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haozii

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 布丁小布点 at 2015-04-18 07:33:59
哦…谢谢~请问 标准品在哪买的?
...

我得回去问下,我是问其他课题组借的
喵~o( =∩ω∩= )m
4楼2015-04-18 13:01:45
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