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企鹅呼呼zz

银虫 (小有名气)

[求助] 磷酸盐缓冲液对色谱柱影响 已有2人参与

做单糖组成的实验
流动相是 0.1mol/L磷酸盐缓冲盐 pH6.7 (13.6g磷酸二氢钾 1.89g氢氧化钠,过0.22膜,脱气)
比例: 磷酸盐缓冲液:乙腈= 83/17
每次实验之前 用83/17的水/乙腈冲柱/子20倍柱体积 然后置换上83/17的磷酸盐缓冲液
每次实验结束 用83/17水/乙腈冲柱子20倍柱体积 逐渐过渡到100乙腈保存

使用中 柱压逐渐升高 压力已经从90bar上升到150bar了
我想知道这是怎么回事?而且柱效也没有原来好了,有什么补救的方法吗
柱子是C18的
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daisyzhangwei

木虫 (职业作家)

不曾来过……

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
企鹅呼呼zz: 金币+1 2015-04-16 13:30:04
应该是磷酸盐析出来了,高比例水相冲,另外,升高点柱温,效果会更好些

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

人生若只如初见...
3楼2015-04-16 11:44:01
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

引用回帖:
8楼: Originally posted by 企鹅呼呼zz at 2015-04-16 13:13:48
我每次实验完也都冲。怎么还会这样。
...

磷酸盐很容易析出,虽然你每次都冲,但是它每次析出一点,次数多了就堵了,压力是渐渐升高的,柱效也下降。
如果你怀疑不是色谱柱堵了可以换其它柱子,如果压力正常,说明就是柱子堵了。
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
9楼2015-04-16 13:18:24
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普通回帖

xuchao7447

木虫 (著名写手)

磷酸盐堵柱子了呗,还是用高水相多冲冲吧
生活就是如此
2楼2015-04-16 10:58:33
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企鹅呼呼zz

银虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by daisyzhangwei at 2015-04-16 11:44:01
应该是磷酸盐析出来了,高比例水相冲,另外,升高点柱温,效果会更好些

压力不是一下上升到150的。是逐渐的。就是用了十几次以后就一次比一次高

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2015-04-16 12:31:05
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

引用回帖:
4楼: Originally posted by 企鹅呼呼zz at 2015-04-16 12:31:05
压力不是一下上升到150的。是逐渐的。就是用了十几次以后就一次比一次高
...

这就是盐析出的典型特征。
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
5楼2015-04-16 12:48:37
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企鹅呼呼zz

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by archbishop at 2015-04-16 12:48:37
这就是盐析出的典型特征。...

那我现在用高水相冲 40度柱温还能行吗

[ 发自小木虫客户端 ]
6楼2015-04-16 12:49:55
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archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

引用回帖:
6楼: Originally posted by 企鹅呼呼zz at 2015-04-16 12:49:55
那我现在用高水相冲 40度柱温还能行吗
...

试试吧。只能这么办了。
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
7楼2015-04-16 13:08:20
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企鹅呼呼zz

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by archbishop at 2015-04-16 13:08:20
试试吧。只能这么办了。...

我每次实验完也都冲。怎么还会这样。

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2015-04-16 13:13:48
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望陈莫及1984

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
企鹅呼呼zz: 金币+1 2015-04-16 13:31:26
柱子被磷酸盐堵了。
用水相走柱子,降低流速,一会就好。
命中注定的自作自受
10楼2015-04-16 13:21:55
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