24小时热门版块排行榜    

查看: 883  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zenghy

新虫 (小有名气)

[求助] 微生物基因组打成片段,用什么方法好?

准备进行微生物基因组二代测序,需要自己建立文库,已经提取基因组DNA,需要将基因组打成片段,是用超声波还是酶切的方法好?倾向于后者,后者的话用什么酶比较好?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zenghy

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
12楼: Originally posted by 大孙20111987 at 2015-04-17 10:55:01
超声的条件主要取决于你的基因组或质粒的G+C含量和你所需片段的大小。一般来说如果你的基因组G+C含量在50%左右,80w*2sec*3次,间歇5秒,可让你得到5-15k的片段,若要减小片段长度,可增加超声时间(3sec)或次数( ...

谢谢楼主啊,我的菌4Mb,GC含量56%,需要用miseq测序,它的读长是2x250bp。
13楼2015-04-17 15:04:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

假丝酵母

铁虫 (初入文坛)

我们组都是用的超声波,效果还可以
2楼2015-04-15 11:59:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zenghy

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 假丝酵母 at 2015-04-15 11:59:19
我们组都是用的超声波,效果还可以

超声多长时间啊?
4楼2015-04-15 15:04:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zenghy

新虫 (小有名气)

我在网上查有用Sau3AI酶切,结果订购要三周才能到货,我的天哦。第一次做,没经验啊
5楼2015-04-15 15:06:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见