应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 酶切
111/2返回列表12下一页
查看: 996  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zhangchong12

新虫 (小有名气)

[求助] 酶切 已有6人参与

为什么质粒提取有天带 酶切后跑电泳却没有条带

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-04-11 07:18:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiqinger

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你确定点上样了吗？此外提取的质粒有几条带，如果只有一条那就错了
赞一下 回复此楼
123456
2楼2015-04-11 20:48:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangchong12

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jiqinger at 2015-04-11 20:48:54
你确定点上样了吗？此外提取的质粒有几条带，如果只有一条那就错了

质粒跑电泳时确实只有一条带 不就只能跑出一条带么

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
3楼2015-04-11 21:27:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangchong12

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhangchong12 at 2015-04-11 21:27:10
质粒跑电泳时确实只有一条带 不就只能跑出一条带么
...

提取的质粒吸了几微跑了电泳有一条条带，今天做了质粒Pcr也有条带，用的载体的通用引物，可是酶切却不行

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2015-04-11 21:33:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiqinger

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhangchong12 at 2015-04-11 21:27:10
质粒跑电泳时确实只有一条带 不就只能跑出一条带么
...

质粒是有一条明显的带，后面还有几条不清晰的带。
赞一下 回复此楼
123456
5楼2015-04-12 10:50:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangjingjing

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该是有三条带，不过我试过一条带也能切出来。会不会是时间，温度或者buffer的问题？
赞一下 回复此楼
努力打败一切
6楼2015-04-12 22:38:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunnypanda

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
怎么会酶切后没有条带了呢 好奇怪啊 质粒跑电泳的时候应该是不止一条带 一条很粗的带 质粒有三种形式存在 所以在粗带周围还会有很弱的带存在 酶切后的胶配的有问题没呢？酶切的时候是不是质粒加的太少了呢？计算了量再加酶~
赞一下 回复此楼
7楼2015-04-13 09:25:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenma521

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
质粒电泳有条带
酶切后就没条带了或显示为弥散状态
解决方法：
可以考虑先乙醇沉淀纯化下你的质粒
酶切的时候，内切酶按照这样的比例加
1ug DNA加10U内切酶加适合的Buffer、H20。 放置37度（根据酶来选择） 15min后就取出跑电泳。就完事了
有些酶不能切长时间，时间长了都切没了。
赞一下 回复此楼
8楼2015-04-13 09:29:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wyjwyjwyj1

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
会不会是该质粒有很多个你用的那个酶的酶切位点？把质粒都切成小于100bp的小片段了？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
9楼2015-04-13 10:15:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaolinlhy

木虫 (小有名气)

屎奔工

【答案】应助回帖

提高质粒的浓度，例如提高菌浓度和减少最后一步洗脱液的用量。我做酶切的时候都是质粒跑的非常亮才进行酶切的。
赞一下 回复此楼
万物逃不过自然法则！
10楼2015-04-15 11:01:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhangchong12 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 Ocx3OKOzGU4q 2026-08-04 6/300 2026-08-04 13:28 by jzdxtiUmJ6PL
[找工作] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 Ocx3OKOzGU4q 2026-08-03 7/350 2026-08-04 13:22 by jzdxtiUmJ6PL
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 Ocx3OKOzGU4q 2026-08-03 8/400 2026-08-04 13:15 by jzdxtiUmJ6PL
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 Ocx3OKOzGU4q 2026-08-03 8/400 2026-08-04 13:15 by jzdxtiUmJ6PL
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +5 Tide man 2026-08-04 8/400 2026-08-04 11:43 by everxc
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Ocx3OKOzGU4q 2026-08-03 6/300 2026-08-04 11:34 by MWRYsWbJw4DE
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 Ocx3OKOzGU4q 2026-08-03 7/350 2026-08-04 11:31 by MWRYsWbJw4DE
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 Ocx3OKOzGU4q 2026-08-03 4/200 2026-08-04 11:26 by MWRYsWbJw4DE
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 17/850 2026-08-04 09:46 by archvillain
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 f1dmPx051StA 2026-08-03 7/350 2026-08-04 09:31 by v1TJC4qJauAB
[博后之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 5/250 2026-08-04 09:27 by v1TJC4qJauAB
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备？ 50+3 kf2781974 2026-07-31 10/500 2026-08-04 08:05 by 88817753
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 9/450 2026-08-04 07:37 by k7OM8YghWbkC
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 6/300 2026-08-04 06:10 by k7OM8YghWbkC
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 6/300 2026-08-04 04:47 by k7OM8YghWbkC
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 8/400 2026-08-04 03:21 by k7OM8YghWbkC
[基金申请] 面上再次挂了，太难了，躺也躺不了，倦也卷不过，小学校之殇！ +19 低垂的野花 2026-07-31 25/1250 2026-08-03 09:25 by gy116024
[基金申请] 2026年国自然面上资助率 +16 布布和一二 2026-07-30 22/1100 2026-08-03 09:20 by gy116024
[基金申请] 微信指数没变化，科研之友没阅读 +15 wangze12014 2026-07-28 19/950 2026-08-02 20:05 by 蔡棒棒菂
[高分子] HXDI做水性聚氨酯乳液，是不是特别容易出渣 15+3 yuyusuv 2026-07-29 3/150 2026-07-31 09:21 by huizingga
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭