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xjsq

银虫 (初入文坛)

[求助] 兔子免疫的详细步骤,, 已有1人参与

兔子免疫的详细步骤,,不甚感激!!
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Amanda燕尾蝶

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xjsq: 金币+10 2015-04-13 22:34:07
免疫首先要有免疫原。
选择月龄3个月体重1.5kg的大耳白兔,饲养于标准动物房内,连续观察三天,确定情况正常后进行免疫。采用背部多点皮下注射和肌肉注射法进行免疫。具体程序如下:
第一天,初次免疫,为更好地刺激实验动物产生免疫反应,采用弗氏完全佐剂乳化免疫原,每只剂量1mg免疫原(溶于1ml 生理盐水和1ml弗氏完全佐剂中)
第14天,加强免疫,每只剂量0.5mg免疫原(溶于0.5ml 生理盐水和0.5ml弗氏不完全佐剂中)
第28天,加强免疫,每只剂量0.5mg免疫原(溶于0.5ml 生理盐水和0.5ml弗氏不完全佐剂中)
第38天,第一次血清测试从兔子耳缘静脉采血,离心分离血清,注意不要造成溶血,测定抗血清效价。
第56天,加强免疫,每只剂量0.5mg免疫原(溶于0.5ml 生理盐水和0.5ml弗氏不完全佐剂中)
第66天,第二次血清测试从兔子耳缘静脉采血,离心分离血清,测定抗血清效价。
第84天,加强免疫,每只剂量0.5mg免疫原(溶于0.5ml 生理盐水和0.5ml弗氏不完全佐剂中)
第94天,第三次血清测试从兔子耳缘静脉采血,离心分离血清,测定抗血清效价。
第112天,加强免疫,每只剂量0.5mg免疫原(溶于0.5ml 生理盐水和0.5ml弗氏不完全佐剂中)
第122天,当抗血清效价达到最高(第四次采血)时处死兔子。采用最常用的股动脉采血法(放血前兔子应禁食一天,以防血脂过高),此法得到的血量较多,每只兔子的采血量在40ml左右,且兔子不易中途死亡。
采到的血液放在离心管里,尽量避免晃动,不要盖紧以防溶血。现在室温下静置3小时,然后于4℃过夜使血块收缩。再将析出的血清全部倾入离心管中,血块于4℃,3500g离心15min,取上清液与前面的血清混合。

摘自师姐论文。。。
我自横刀向天笑,笑完我就去睡觉。
2楼2015-04-10 09:55:08
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xjsq

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Amanda燕尾蝶 at 2015-04-10 09:55:08
免疫首先要有免疫原。
选择月龄3个月体重1.5kg的大耳白兔,饲养于标准动物房内,连续观察三天,确定情况正常后进行免疫。采用背部多点皮下注射和肌肉注射法进行免疫。具体程序如下:
第一天,初次免疫,为更好地刺 ...

我的抗原是细菌全蛋白,,那么我应该怎样提取细菌的全蛋白呢?我看有论文上是l00℃沸水煮 2h,但这样不会使蛋白变性吗?
3楼2015-04-10 16:52:15
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Amanda燕尾蝶

木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by xjsq at 2015-04-10 16:52:15
我的抗原是细菌全蛋白,,那么我应该怎样提取细菌的全蛋白呢?我看有论文上是l00℃沸水煮 2h,但这样不会使蛋白变性吗?...

sorry, 你说的这个提取细菌全蛋白这个我没做过,不了解呢。。。
我自横刀向天笑,笑完我就去睡觉。
4楼2015-04-10 17:00:26
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lima1988

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Amanda燕尾蝶 at 2015-04-10 09:55:08
免疫首先要有免疫原。
选择月龄3个月体重1.5kg的大耳白兔,饲养于标准动物房内,连续观察三天,确定情况正常后进行免疫。采用背部多点皮下注射和肌肉注射法进行免疫。具体程序如下:
第一天,初次免疫,为更好地刺 ...

能把您师姐的论文发一份过来吗?wuli8890@163.com,目前在做抗体研发,遇到了很多问题,谢谢了啊!
奋斗是80后不变的话题
5楼2015-07-09 15:39:07
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