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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » DNA聚合反应求指导
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justsmiling

银虫 (小有名气)

[求助] DNA聚合反应求指导 已有2人参与

分子信标跟引物在聚合酶作用下将分子信标打开，为什么我做的引物跟分子信标的荧光值只能达到分子信标跟其互补链的30%，这个跟哪些因素有关呢
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1楼 2015-04-07 22:06:40
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justsmiling

银虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by greeneese at 2015-04-09 09:31:37
杂交和聚合的温度呢？

模拟显示在聚合酶最优工作温度37℃下这两条链的杂交比例很低。...

请问你用的什么软件模拟的呢，我用IDT模拟的MB的Tm 值是50.5oC，是怎么看杂交比例的呢
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12楼2015-04-11 21:26:26
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greeneese

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2015-04-08 09:32:03
方便透露一下你用的链的序列吗？第一印象是你用的引物链不足以结合在分子信标上。
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2楼2015-04-08 08:32:51
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justsmiling

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by greeneese at 2015-04-08 08:32:51
方便透露一下你用的链的序列吗？第一印象是你用的引物链不足以结合在分子信标上。

我的链是以前师兄做过的，但是他能恢复到80%，我就只能到30%
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3楼2015-04-08 10:57:54
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greeneese

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by justsmiling at 2015-04-08 10:57:54
我的链是以前师兄做过的，但是他能恢复到80%，我就只能到30%...

那就是不方便透露你用的链的序列喽？

很难在不知道这种信息的情况下帮你。
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4楼2015-04-08 14:57:11
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