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shanhu1234

新虫 (初入文坛)

[求助] 液相色谱流动相配比改变后,标样的峰高峰面积变化很大 已有8人参与

求救大神,液相色谱菜鸟一枚,在做二氯喹啉酸的农残分析,查阅文献,前处理后跑液相,色谱条件:
流动相(乙腈:水=1:1,水PH用磷酸调到4),流速(1ml/min),波长225nm,进样量20μl
在此条件下,标样出峰时间较早,保留时间4min左右,样品峰不太分开,且8min左右就不出峰。调整了流动相比例后(乙腈:水=1:3),增加水相,保留时间确实后移了,15min左右,但峰高和峰面积明显降低,且浓度较低的基本不能出峰。样品峰值也极小,根本也不好判断是不是我的目标物,求救各位大神!!!
小妹最近因此心力交瘁,晚上做梦都在跑液相。。。。
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xuchao7447

木虫 (著名写手)

引用回帖:
14楼: Originally posted by shanhu1234 at 2015-04-03 14:44:42
今天试了甲醇和水混合的流动相(3:2),保留时间成5min了,且峰面积竟然和之前乙腈和水做流动相(1:3,保留时间15min)差不多,样品峰又分不开了,我还要怎么办...

那建议你还是换成梯度洗脱吧,先用高比例的水相,然后慢慢切换至高浓度的有机相!!!换了溶剂应该不至于造成保留时间发生变化的啊,你这根柱子,每次的柱压都是稳定在一个定值范围吗,还是每次都不一样?你的样品浓度是多少,还有第一次测得时候和现在的样品浓度是一样的吗?
生活就是如此
15楼2015-04-03 15:16:56
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
shanhu1234: 金币+1, 有帮助 2015-04-08 10:06:23
出峰时间早 峰高相对较高是正常的;但是调整比例后,浓度较低的就检测不到有点不正常,是不是波长选择不合适,或者进样浓度太低了。
归零
2楼2015-04-02 20:52:20
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shanhu1234

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by klicking at 2015-04-02 20:52:20
出峰时间早 峰高相对较高是正常的;但是调整比例后,浓度较低的就检测不到有点不正常,是不是波长选择不合适,或者进样浓度太低了。

感谢回复,波长选择应该是合适的,之前出峰早时都可以,换了流动相比例后,进样浓度1mg/L都已经出峰很小,0.5mg/L基本没有,可能是小了点,但文献中的标曲范围是0.01--20mg/L,我现在该怎么做呢
3楼2015-04-02 21:25:08
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by shanhu1234 at 2015-04-02 21:25:08
感谢回复,波长选择应该是合适的,之前出峰早时都可以,换了流动相比例后,进样浓度1mg/L都已经出峰很小,0.5mg/L基本没有,可能是小了点,但文献中的标曲范围是0.01--20mg/L,我现在该怎么做呢...

你检测器使用多长时间了?
归零
4楼2015-04-02 21:36:47
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