24小时热门版块排行榜    

查看: 1705  |  回复: 9

yujifeierhwf

新虫 (初入文坛)

[求助] 拖带现象 已有3人参与

我的目的条带是1kb,运用降落PCR,多次改变了退火温度,反应体系也优化,引物模板也换过,但出现的现象都大同小异,从加样孔就开始拖带,一片白色
回复此楼
努力成为专业人士
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)

发图来看看
采菊东篱下,悠然见南山。
2楼2015-04-01 16:59:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有没有可能是扩增酶的问题?
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
3楼2015-04-01 17:01:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

浩远天涯

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、引物设计不好,pcr产物不纯
2、琼脂糖凝胶制的不好(加热融化时不完全,在光下还可以看到小珠子),也会有拖尾现象
楼主应该上个图的
4楼2015-04-01 21:45:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujifeierhwf

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 浩远天涯 at 2015-04-01 21:45:07
1、引物设计不好,pcr产物不纯
2、琼脂糖凝胶制的不好(加热融化时不完全,在光下还可以看到小珠子),也会有拖尾现象
楼主应该上个图的

引物完全配对;marker没有拖带现象,稍等图片上来
努力成为专业人士
5楼2015-04-02 08:50:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujifeierhwf

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-04-01 17:01:01
有没有可能是扩增酶的问题?

marker的条带没问题,对照品也正常,酶应该没什么问题的
努力成为专业人士
6楼2015-04-02 09:14:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujifeierhwf

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 浩远天涯 at 2015-04-01 21:45:07
1、引物设计不好,pcr产物不纯
2、琼脂糖凝胶制的不好(加热融化时不完全,在光下还可以看到小珠子),也会有拖尾现象
楼主应该上个图的

marker和对照品没有拖带,引物完全配对,就是目的基因的GC含量较高,图片不会上传
努力成为专业人士
7楼2015-04-02 09:16:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

引用回帖:
7楼: Originally posted by yujifeierhwf at 2015-04-02 09:16:58
marker和对照品没有拖带,引物完全配对,就是目的基因的GC含量较高,图片不会上传...

目的基因的GC含量高,才是你扩不出来的原因,你不说谁知道啊,,,,,
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
8楼2015-04-02 10:10:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

浩远天涯

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by yujifeierhwf at 2015-04-02 09:16:58
marker和对照品没有拖带,引物完全配对,就是目的基因的GC含量较高,图片不会上传...

楼主的模板是提的基因组还是直接菌落呀,模板不好也可能有拖带。楼主对照没问题,说明PCR条件及引物都没问题,就是不知对照组条带亮度如何?
9楼2015-04-02 10:54:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chibang1220

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没图不好说,应该是DNA有讲解,或者是引物特异性不好存在非特异扩增,还可能是你胶的浓度太高,试试0.4%浓度胶,希望对你有帮助
人的差别在于业余时间
10楼2015-04-02 22:59:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yujifeierhwf 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +26 医学老男孩 2026-08-13 56/2800 2026-08-15 13:47 by 医学老男孩
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +5 archvillain 2026-08-15 9/450 2026-08-15 12:06 by archvillain
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 7lpolszZVXgi 2026-08-14 8/400 2026-08-15 11:53 by KxMI1BYBxWX1
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-15 11:41 by KxMI1BYBxWX1
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 7lpolszZVXgi 2026-08-14 6/300 2026-08-15 09:28 by sunzitan
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 5/250 2026-08-15 04:45 by 4wMiSEwB6436
[找工作] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 k0dTPqJtl0jt 2026-08-14 4/200 2026-08-15 02:21 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +11 Tide man 2026-08-10 12/600 2026-08-15 02:12 by home3163
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[论文投稿] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 5/250 2026-08-15 00:16 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
信息提示
请填处理意见