应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 拖带现象
101/1返回列表
查看: 1734  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yujifeierhwf

新虫 (初入文坛)

[求助] 拖带现象 已有3人参与

我的目的条带是1kb，运用降落PCR，多次改变了退火温度，反应体系也优化，引物模板也换过，但出现的现象都大同小异，从加样孔就开始拖带，一片白色
回复此楼

» 猜你喜欢
努力成为专业人士
1楼 2015-04-01 16:16:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)
发图来看看
回复此楼
采菊东篱下，悠然见南山。
2楼2015-04-01 16:59:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有没有可能是扩增酶的问题？
赞一下 回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
3楼2015-04-01 17:01:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

浩远天涯

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1、引物设计不好，pcr产物不纯
2、琼脂糖凝胶制的不好（加热融化时不完全，在光下还可以看到小珠子），也会有拖尾现象
楼主应该上个图的
赞一下 回复此楼
4楼2015-04-01 21:45:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujifeierhwf

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 浩远天涯 at 2015-04-01 21:45:07
1、引物设计不好，pcr产物不纯
2、琼脂糖凝胶制的不好（加热融化时不完全，在光下还可以看到小珠子），也会有拖尾现象
楼主应该上个图的

引物完全配对；marker没有拖带现象，稍等图片上来
赞一下 回复此楼
努力成为专业人士
5楼2015-04-02 08:50:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujifeierhwf

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-04-01 17:01:01
有没有可能是扩增酶的问题？

marker的条带没问题，对照品也正常，酶应该没什么问题的
赞一下 回复此楼
努力成为专业人士
6楼2015-04-02 09:14:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujifeierhwf

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 浩远天涯 at 2015-04-01 21:45:07
1、引物设计不好，pcr产物不纯
2、琼脂糖凝胶制的不好（加热融化时不完全，在光下还可以看到小珠子），也会有拖尾现象
楼主应该上个图的

marker和对照品没有拖带，引物完全配对，就是目的基因的GC含量较高，图片不会上传
赞一下 回复此楼
努力成为专业人士
7楼2015-04-02 09:16:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫
引用回帖:
7楼: Originally posted by yujifeierhwf at 2015-04-02 09:16:58
marker和对照品没有拖带，引物完全配对，就是目的基因的GC含量较高，图片不会上传...

目的基因的GC含量高，才是你扩不出来的原因，你不说谁知道啊，，，，，
赞一下 回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
8楼2015-04-02 10:10:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

浩远天涯

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by yujifeierhwf at 2015-04-02 09:16:58
marker和对照品没有拖带，引物完全配对，就是目的基因的GC含量较高，图片不会上传...

楼主的模板是提的基因组还是直接菌落呀，模板不好也可能有拖带。楼主对照没问题，说明PCR条件及引物都没问题，就是不知对照组条带亮度如何？
赞一下 回复此楼
9楼2015-04-02 10:54:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chibang1220

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
没图不好说，应该是DNA有讲解，或者是引物特异性不好存在非特异扩增，还可能是你胶的浓度太高，试试0.4%浓度胶，希望对你有帮助
赞一下 回复此楼
人的差别在于业余时间
10楼2015-04-02 22:59:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yujifeierhwf 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-16 22:16 by Tql5LQhh5rLK
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 5/250 2026-09-16 20:38 by MHf40yA0Uhyb
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-16 19:15 by rRvxEj3zorCy
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 6/300 2026-09-16 17:27 by i3KBRD19ERkG
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-16 17:03 by i3KBRD19ERkG
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +8 两三岁ss 2026-09-14 8/400 2026-09-16 09:46 by 水士口
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-16 07:48 by i0IGWqQuchto
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 0pYnUiPDfdnk 2026-09-14 3/150 2026-09-16 06:51 by LH5NkK5Ud4bh
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-16 05:27 by LH5NkK5Ud4bh
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-16 03:35 by DgNGHc3h5tPl
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-16 03:23 by DgNGHc3h5tPl
[找工作] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 3/150 2026-09-16 02:38 by DgNGHc3h5tPl
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:59 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:47 by CgyNCDVNhGVg
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:58 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:46 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 07:02 by 5BDX0d0WFp7t
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:50 by 5BDX0d0WFp7t
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭