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baronwhy

木虫 (小有名气)

[求助] 关于用S1 nuclear酶处理大片段及回收的问题

想要删除质粒中某段,双酶切某质粒,得到大片段,想用s1 nuclear磨平黏末端,然后使用T4连接酶连接大片段。
有没有使用过s1 nuclear的朋友,能说下有什么需要注意的地方吗?
同时,按照说明书上,一次反应体系为30微升,之后如何回收大片段呢?用异丙醇沉淀?或者直接加溶胶液用试剂盒回收?
谢谢。
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