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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 关于pCAMBIA1301载体构建中GUS是否切除的问题？
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zuquwen

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于pCAMBIA1301载体构建中GUS是否切除的问题？

我看文献中好多人用pCAMBIA1301顺时针的35S作为启动子，都是用Nco I和Bst EII把GUS切掉，插入目的基因。我没把GUS切掉，而是用Nco I和Bgl II双酶切，把目的基因连接到Nco I和Bgl II之间，目的基因自带终止密码子，不切除GUS，但把GUS废了。请问这种情况下目的基因能正常过表达吗？请问有没有这样做的文献可供参考？
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1楼 2015-03-30 15:33:06
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zuquwen

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-03-30 15:46:57
留在gus干嘛，多此一举，你做WB检测只能用自身抗体啦，多了好多活啊

如果切掉gus的话，WB能用什么抗体检测？一直以为WB都是自身抗体检测的。
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3楼2015-03-30 16:04:15
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Neo2000

木虫 (著名写手)
留在gus干嘛，多此一举，你做WB检测只能用自身抗体啦，多了好多活啊

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2015-03-30 15:46:57
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