24小时热门版块排行榜    

查看: 2365  |  回复: 5

孟怀

新虫 (小有名气)

[交流] 状态很好的贴壁细胞刚换完液几分钟就大量的萎缩漂起来了,新人求指导!!!!

一起给4瓶T75汇合度为百分之八九十状态很好的贴壁细胞CHO换液,换完液后4四五分钟有大量细胞萎缩,竖起瓶子后细胞成片大量掉下来,我不知道这是什么情况,求广大同行前辈们帮我分析下,感激不尽!!!这个细胞是在此次换液前一天传的代,换液时90%为长梭形,像竹叶,状态很好。因为实验时间的问题此次换液直接用了从4℃冰箱拿出来的PBS和培养基,每瓶用PBS润洗3遍后才一起加的培养基,加液用的是电子移液枪。我不知道是不是低温PBS和培养基的问题?还是我换液操作的问题(每瓶洗三遍后再洗下一瓶)?或者说是其他原因?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

孟怀
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孟怀

新虫 (小有名气)

求版主帮顶!!!谢谢!

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
孟怀
2楼2015-03-29 01:34:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaoyingjun

铁杆木虫 (职业作家)

★
孟怀: 金币+1 2015-03-29 23:43:30
不懂哦
一起努力,共同进步
3楼2015-03-29 01:53:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿Q~~

至尊木虫 (文坛精英)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
孟怀: 金币+1 2015-03-29 23:43:04
路过的看了一下,帮顶,祝福好运!~~~~~~~~~~~~~~~~~~
自强不息,厚德载物;独立精神,自由思想。
4楼2015-03-29 07:18:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hbl215

金虫 (文坛精英)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
孟怀: 金币+5 2015-03-29 23:42:54
是在试验中么,这个汇合度应该传代了呀。4度的培养基对细胞会有影响,但不应该影响这么大,CHO是很皮实,贴壁比较牢的细胞,PBS洗三遍这有点多了,因不知道你是否是实验需要彻底换液,一般换液弃去旧培养基,换上新的就可以了。然后细胞怕被吹干,从你的描述看可能是你操作过程,细胞在没有PBS或培养基的情况下比较久,再加低温的影响,导致细胞死亡,细胞弃去液体,最好马上就补上液体。
5楼2015-03-29 12:50:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孟怀

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by hbl215 at 2015-03-29 12:50:52
是在试验中么,这个汇合度应该传代了呀。4度的培养基对细胞会有影响,但不应该影响这么大,CHO是很皮实,贴壁比较牢的细胞,PBS洗三遍这有点多了,因不知道你是否是实验需要彻底换液,一般换液弃去旧培养基,换上新 ...

谢谢您,有可能真是细胞干涸太久外加低温刺激使细胞萎缩漂浮了。这是实验室以前构建好的工程细胞,用于表达目的蛋白的。我前面在汇合度为90%以上的时候换先换5%血清培养基养一两天在换无血清培养基静息产蛋白的,连样5、6天都没问题。PBS洗三遍是因为我每次换完液后都还有少数漂浮的细胞。
孟怀
6楼2015-03-29 23:42:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 孟怀 的主题更新
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[文学芳草园] 厉娜 +3 张丹枫1991 2026-11-09 5/250 2026-11-09 16:53 by 张丹枫1991
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 12/600 2026-11-09 13:26 by Equinoxhua
[考研] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 15/750 2026-11-09 13:19 by Equinoxhua
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 14/700 2026-11-09 11:52 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 16/800 2026-11-09 11:47 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 10/500 2026-11-09 08:00 by IhnEQauGmT3K
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 12/600 2026-11-09 06:32 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-09 00:14 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-08 23:01 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 9/450 2026-11-08 22:46 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”:确已离世,正核实举报内容 +3 yexuqing 2026-11-04 5/250 2026-11-07 13:22 by 苏东坡二世
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
信息提示
请填处理意见