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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 细胞不贴壁
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黎花梦香

新虫 (初入文坛)

[求助] 细胞不贴壁 已有2人参与

刚买的两株细胞，原培养液为MEM+10%FBS+1%双抗，我们的培养液是DMEM+15%FBS+1%双抗，按道理说应该营养更充足了，可是刚开始用他们的培养基的时候细胞状态很好，长的也快，一换我们自己的培养基就不行了，传代后第一天是贴壁的，第二天就开始飘了，而且越飘越多，这是什么原因呢？两株细胞的情况一样
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1楼 2015-09-23 10:52:57
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zoe0813

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
黎花梦香: 金币+1 2015-09-24 18:34:26
还用原来的培养，最好不要变，或者你想试试可以分一部分出来试，其他的还用原来的培养
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2楼2015-09-23 11:07:18
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黎花梦香

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zoe0813 at 2015-09-23 11:07:18
还用原来的培养，最好不要变，或者你想试试可以分一部分出来试，其他的还用原来的培养

这种有没有可能是支原体污染呢？因为也没发现细菌污染
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3楼2015-09-23 12:07:05
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zhangshuman

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
黎花梦香: 金币+2, ★有帮助 2015-09-24 18:34:15
如果培养基不变浑浊就不是细菌污染，之前遇到过细胞不贴壁但是培养基还透亮的情况。最后发现是支原体污染，因为买了支原体抑制剂就没事儿了，不过这个好贵。建议换血清，因为支原体污染一般来源于血清。可以参考

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4楼2015-09-23 16:07:46
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黎花梦香

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhangshuman at 2015-09-23 16:07:46
如果培养基不变浑浊就不是细菌污染，之前遇到过细胞不贴壁但是培养基还透亮的情况。最后发现是支原体污染，因为买了支原体抑制剂就没事儿了，不过这个好贵。建议换血清，因为支原体污染一般来源于血清。可以参考
...

我怀疑也是，可是怎么判断支原体感染呢？血清是分装好冻起来之后拿出来用的，其他人用的挺好，那会是什么原因引起的呢？
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5楼2015-09-24 09:29:28
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zhangshuman

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 黎花梦香 at 2015-09-24 09:29:28
我怀疑也是，可是怎么判断支原体感染呢？血清是分装好冻起来之后拿出来用的，其他人用的挺好，那会是什么原因引起的呢？...

我们判断是通过在培养基里面加支原体抑制剂，加入后再培养的细胞就没有问题了。最后我们把分装的血清全都扔掉换新的了。
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6楼2015-09-24 13:23:00
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