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黎花梦香

新虫 (初入文坛)

[求助] 细胞不贴壁 已有2人参与

刚买的两株细胞,原培养液为MEM+10%FBS+1%双抗,我们的培养液是DMEM+15%FBS+1%双抗,按道理说应该营养更充足了,可是刚开始用他们的培养基的时候细胞状态很好,长的也快,一换我们自己的培养基就不行了,传代后第一天是贴壁的,第二天就开始飘了,而且越飘越多,这是什么原因呢?两株细胞的情况一样
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zoe0813

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
黎花梦香: 金币+1 2015-09-24 18:34:26
还用原来的培养,最好不要变,或者你想试试可以分一部分出来试,其他的还用原来的培养
2楼2015-09-23 11:07:18
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黎花梦香

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zoe0813 at 2015-09-23 11:07:18
还用原来的培养,最好不要变,或者你想试试可以分一部分出来试,其他的还用原来的培养

这种有没有可能是支原体污染呢?因为也没发现细菌污染
3楼2015-09-23 12:07:05
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zhangshuman

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
黎花梦香: 金币+2, 有帮助 2015-09-24 18:34:15
如果培养基不变浑浊就不是细菌污染,之前遇到过细胞不贴壁但是培养基还透亮的情况。最后发现是支原体污染,因为买了支原体抑制剂就没事儿了,不过这个好贵。建议换血清,因为支原体污染一般来源于血清。可以参考

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2015-09-23 16:07:46
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黎花梦香

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zhangshuman at 2015-09-23 16:07:46
如果培养基不变浑浊就不是细菌污染,之前遇到过细胞不贴壁但是培养基还透亮的情况。最后发现是支原体污染,因为买了支原体抑制剂就没事儿了,不过这个好贵。建议换血清,因为支原体污染一般来源于血清。可以参考
...

我怀疑也是,可是怎么判断支原体感染呢?血清是分装好冻起来之后拿出来用的,其他人用的挺好,那会是什么原因引起的呢?
5楼2015-09-24 09:29:28
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zhangshuman

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 黎花梦香 at 2015-09-24 09:29:28
我怀疑也是,可是怎么判断支原体感染呢?血清是分装好冻起来之后拿出来用的,其他人用的挺好,那会是什么原因引起的呢?...

我们判断是通过在培养基里面加支原体抑制剂,加入后再培养的细胞就没有问题了。最后我们把分装的血清全都扔掉换新的了。
6楼2015-09-24 13:23:00
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