应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » miRNA提取加入酸苯酚氯仿后不分层或出现大量白色悬浮物怎么办？
51/1返回列表
查看: 1493  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

慕千雪

新虫 (初入文坛)

[求助] miRNA提取加入酸苯酚氯仿后不分层或出现大量白色悬浮物怎么办？ 已有2人参与

如题，小女子用的Axygen的miRNA提取试剂盒，HepG2细胞。加酚氯仿离心后，要么不分层，要么分层，但是有大量白色悬浮物质，根本无法吸取足够的上清液（见附图）。
重复了好多次实验呐，都是这个问题，简直要崩溃。。。。
师姐用相同的试剂盒提取时没有碰到这个问题，自己做时就总是这样，好伤心~~~~(>_<~~~~
不知有木有碰到类似情况的，为啥会这样啦？怎么解决的呢？

miRNA提取加入酸苯酚氯仿后不分层或出现大量白色悬浮物怎么办？
IMG_20150326_211138.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-03-26 22:55:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

whwei321

至尊木虫 (职业作家)

小虫

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
慕千雪: 金币+1 2015-03-27 09:48:26
离心速度加大13000转，时间延长30分′试一下

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
坚持就是胜利
2楼2015-03-26 23:40:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

慕千雪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by whwei321 at 2015-03-26 23:40:03
离心速度加大13000转，时间延长30分′试一下

木有用的说。。。有几次看到有那么大一块白色的东西，就涡旋、静置，重新拿去离心，然后干脆连原来就有的分层也不分了。。。
不知道那坨白色的是什么啊，按理说加了酚氯仿无论怎样都该分层吧，可是居然再次混匀离心有不分层了。。。
赞一下 回复此楼
3楼2015-03-27 09:48:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
慕千雪: 金币+4, ★有帮助, 非常感谢！我一直是按方法一操作的，方法二可以尝试一下 2015-03-30 11:52:14
方法一：倒掉旧的培养基，再用已经高压灭菌过的PBS洗1－2次，在吹打下HepG2细胞。
方法二；吸取全部的上清，用0.22的过滤器直接过滤。miRNA不受过滤影响。
祝你成功。
赞一下 回复此楼
采菊东篱下，悠然见南山。
4楼2015-03-27 10:06:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 781055707 at 2015-03-27 10:06:23
方法一：倒掉旧的培养基，再用已经高压灭菌过的PBS洗1－2次，在吹打下HepG2细胞。
方法二；吸取全部的上清，用0.22的过滤器直接过滤。miRNA不受过滤影响。
祝你成功。

还有替换方法三，HepG2细胞是人肝癌细胞，如果你要的是人miRNA，你大可以用其他细胞，或人自己血液中的白细胞，也能得到28S和18S.
赞一下(1人) 回复此楼
采菊东篱下，悠然见南山。
5楼2015-03-27 10:13:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 慕千雪 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 SX5mJmPWDfOO 2026-11-13 4/200 2026-11-15 07:34 by xSrQNSSjcgoX
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 uKOSCocCb6Fm 2026-11-13 3/150 2026-11-15 04:05 by xSrQNSSjcgoX
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 uKOSCocCb6Fm 2026-11-12 6/300 2026-11-15 02:59 by xSrQNSSjcgoX
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 uKOSCocCb6Fm 2026-11-12 10/500 2026-11-15 02:15 by xSrQNSSjcgoX
[考博] 考博求助 10+3 社会实践对别 2026-11-08 3/150 2026-11-13 14:04 by 沐小虫252
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 5/250 2026-11-12 12:28 by ECLTXnJnRSXf
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 4/200 2026-11-12 12:26 by ECLTXnJnRSXf
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:33 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 6/300 2026-11-12 11:22 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +7 czAiolzR0IJC 2026-11-10 9/450 2026-11-12 11:00 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 8/400 2026-11-12 10:27 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:16 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:08 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 12/600 2026-11-12 09:32 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 3/150 2026-11-12 08:26 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 3/150 2026-11-12 07:53 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 FChKX8meu1ds 2026-11-09 7/350 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 7/350 2026-11-12 05:19 by 9fOTqj074tIg
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 8/400 2026-11-12 05:00 by 9fOTqj074tIg
[考博] 申请环境，微生物方向博士 +3 浅笑09 2026-11-08 3/150 2026-11-10 12:44 by 可淡不可忘
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭