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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 有木有做RACE的高人呀，求教
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waterrainbow

金虫 (小有名气)

[求助] 有木有做RACE的高人呀，求教 已有2人参与

最近一直在做E.coli中一个基因的5‘ RACE，clontech的试剂盒，老贵了，奈何试了3次都未扩出全长，惶恐啊，个人觉得是RNA质量不大好，所以想请教下高手们，提完RNA后可以不用DNase消化么，尽量减少RNA的损失
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Alwaysbegrateful...
1楼 2015-03-26 16:24:37
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-03-29 23:13:52
既然是大肠杆菌，何不直接查基因组数据得了，再不行就在基因组上整个walking，从RNA入手有点。。。

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2015-03-26 19:01:42
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waterrainbow

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-03-26 19:01:42
既然是大肠杆菌，何不直接查基因组数据得了，再不行就在基因组上整个walking，从RNA入手有点。。。

新研究一条通路，想确定这条通路对某个基因的调控作用，查找对应的转录起始位点，所以就RACE扩增下5'端
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Alwaysbegrateful...
3楼2015-03-26 20:38:53
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dehong1573

至尊木虫 (正式写手)
是的，做调控是必须找出转录其实位点，最近也打算做，所以没什么经验，坐等高手，顺便问问那个kit多少钱？
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科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
4楼2015-03-27 08:02:38
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waterrainbow

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by dehong1573 at 2015-03-27 08:02:38
是的，做调控是必须找出转录其实位点，最近也打算做，所以没什么经验，坐等高手，顺便问问那个kit多少钱？

8000+，10次
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Alwaysbegrateful...
5楼2015-03-27 08:32:35
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peng1997

新虫 (小有名气)
重新提RNA吧
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6楼2015-03-28 21:18:47
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waterrainbow

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by peng1997 at 2015-03-28 21:18:47
重新提RNA吧

前辈做过么，我已经换了各种方法提了很多次RNA了，还望多多指点
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Alwaysbegrateful...
7楼2015-04-01 14:58:11
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peng1997

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by waterrainbow at 2015-04-01 14:58:11
前辈做过么，我已经换了各种方法提了很多次RNA了，还望多多指点...

条带不行 不要急着往下做 费时费试剂盒
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8楼2015-04-01 20:14:55
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我欲乘风归去

木虫 (正式写手)
RACE都是用试剂盒，真有钱。我们都是自己用土方法做的。trizol提取液里面含有DNA酶，takara的RNAiso貌似也可以
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。
9楼2015-04-02 09:03:17
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meier158

禁虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★
waterrainbow: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-04-02 15:24:15
本帖内容被屏蔽
10楼2015-04-02 11:54:06
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