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急！急！急！第一次做PCR条带，求各师哥师姐给看看 已有4人参与
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这是我做的PCR条带 我用的酶是ExTaq 体系（50微升）：酶 0.5 引物1、引物2：各4 buffer： 5 dntp: 5 水 27.5 模板： 4 我想问 ：1.我的PCR条带中marker条带为什么有拖尾？ 2.我的marker条带数很多，这个正常么？我用的marker-dL2000，求指教  PCR.png |
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781055707
木虫 (著名写手)
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4楼2015-03-25 13:29:05
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木虫 (正式写手)
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2楼2015-03-25 13:12:08
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-03-26 22:12:06
黑西虾虾: 金币+4, ★★★很有帮助, 给的建议对我很有帮助，可是建议有些给的太多了，只需要回答跟我问题有关的就行了 2015-03-29 15:11:25
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黑西虾虾: 金币+4, ★★★很有帮助, 给的建议对我很有帮助，可是建议有些给的太多了，只需要回答跟我问题有关的就行了 2015-03-29 15:11:25
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首先，跑的带不错，给几个建议： 1、引物加的太多，50 μ L 体系中10 μM 引物上下游分别加2 μL就好了； 2、dNTP加的太多，50 μL 体系加1 μL 就好了； 3、模板也加多了，50 μ L 体系中20 ng/ μL加2 μ L足矣。 4、你这个Marker不是DL2000，DL2000是6条带，分别是2000，,1000,750,500,200,100，其中750带最亮。 5、Marker拖尾除了电泳本身的问题（你这个电泳没有问题的），一般只有一个解释，那就是使用时间长了，部分降解所致。 |
3楼2015-03-25 13:22:44
5楼2015-03-25 15:41:41