应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求高人指点不对称PCR得到的产物是否为单链
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
81/1返回列表
查看: 5164  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

kaqikun

新虫 (初入文坛)

[求助] 求高人指点不对称PCR得到的产物是否为单链 已有1人参与

为了得到单链DNA，做了不对称PCR，模板为双链PCR产物，下游引物浓度为上游引物浓度的1/50。电泳条件为1%普通琼脂糖凝胶，120V电压，EB染色。从左到右依次为4500Marker、gDNA、双链PCR产物、不对称PCR产物、2000Marker。可是从条带位置看不对称PCR产物只比双链PCR产物小一点儿，不像论坛里有人说的单链PCR比双链PCR要小一半左右所出的位置。
请高人指点：我这个不对称PCR得到的产物是单链DNA吗？如果是的话，这个单链出的位置对吗？
 \"求高人指点不对称PCR得到的产物是否为单链\"
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-03-25 06:36:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫
看不到图片
回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
2楼2015-03-25 08:41:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kaqikun

新虫 (初入文坛)
内容已删除
回复此楼
3楼2015-03-25 08:45:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kaqikun: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-03-29 15:33:23
不对称PCR有两种方法，第一种，在PCR扩增时，先用等浓度的引物PCR扩增，先得到双链DNA，然后以这双链DNA为模板，再以其中的一条引物进行第二次PCR，制备单链DNA。第二种方法，用不等量的PCR引物进行扩增，，扩增后产生大量的单链DNA。这对引物分别称为非限制引物和限制引物，他们的比例一般为50-100:1.在PCR扩增的最初10-15个循环中，产物大多为双链DNA，但是当限制性引物消耗完之后，非限制性引物就会产生大量的单链DNA。这就是不对称PCR。不对称PCR的关键就是控制限制性引物的绝对量，这需要经过实验多次摸索优化两条引物的量而最终得到最佳的比例。你现在的方法一次成功是有情可原的，关键是要优化两条引物的量，你现在的这个产物应该不是单链DNA，或者你直接按照第一种方法做。
赞一下(1人) 回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
4楼2015-03-25 08:48:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kaqikun

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 18761615793 at 2015-03-25 08:48:28
不对称PCR有两种方法，第一种，在PCR扩增时，先用等浓度的引物PCR扩增，先得到双链DNA，然后以这双链DNA为模板，再以其中的一条引物进行第二次PCR，制备单链DNA。第二种方法，用不等量的PCR引物进行扩增，，扩增后产 ...

非常感谢。我已经在尝试第一种方法了
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2015-03-25 10:03:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫
引用回帖:
5楼: Originally posted by kaqikun at 2015-03-25 10:03:41
非常感谢。我已经在尝试第一种方法了...

祝你成功，不谢
回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
6楼2015-03-25 10:04:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangguolin11

新虫 (初入文坛)
成功没有
回复此楼
7楼2015-07-24 15:18:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小奶酪酪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by kaqikun at 2015-03-25 08:45:30
...

亲 实验做出来了吗
赞一下 回复此楼
8楼2016-01-27 16:47:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 kaqikun 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿厦门大学化学学硕307求调剂 +10 y7czhao 2026-03-26 10/500 2026-03-28 14:23 by 唐沐儿
[考研] 317求调剂 +6 十闲wx 2026-03-24 6/300 2026-03-28 13:27 by Iveryant
[考研] 一志愿上海理工能源动力（085800）310分求调剂 +3 zhangmingc 2026-03-27 4/200 2026-03-27 19:01 by 给你你注意休息
[考研] 312求调剂 +9 上岸吧ZJY 2026-03-22 13/650 2026-03-27 11:24 by sanrepian
[考研] 0703化学一志愿南京师范大学303求调剂 +3 zzffylgg 2026-03-24 3/150 2026-03-27 10:42 by shangxh
[考研] 359求调剂 +4 王了个楠 2026-03-25 4/200 2026-03-27 08:43 by 不吃魚的貓
[考研] 求调剂，一志愿 南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕 +4 @taotao 2026-03-26 5/250 2026-03-27 08:10 by hypershenger
[考研] 341求调剂 +7 青柠檬1 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:19 by wxiongid
[考研] 材料考研求调剂 +3 Dendel 2026-03-23 6/300 2026-03-26 17:51 by fmesaito
[考研] 寻找调剂 +5 倔强芒? 2026-03-21 8/400 2026-03-26 13:25 by 0906ljy
[考研] 291 求调剂 +7 化工2026届毕业� 2026-03-21 8/400 2026-03-26 11:25 by AlenQIN.
[考研] 生物技术与工程 +3 1294608413 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:02 by 1294608413
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:23 by userper
[考研] 一志愿南航材料专317分求调剂 +5 炸呀炸呀炸薯条 2026-03-23 5/250 2026-03-24 16:52 by 星空星月
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +4 17501029541 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:21 by 戴围脖的小蚊子
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 6/300 2026-03-23 21:45 by 子系博
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境，总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭