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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » D101大孔吸附树脂柱上样后冲洗时出现问题，急，求助。
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放空的梦

铜虫 (小有名气)

[求助] D101大孔吸附树脂柱上样后冲洗时出现问题，急，求助。已有2人参与

一种中草药的正丁醇部位浸膏，选择D101大孔吸附树脂粗分，上样后，选择水，10%乙醇，30%乙醇，50%乙醇，70%乙醇，90%乙醇洗脱，问题
1  刚用水冲洗时冲洗液是澄清的，中间浑浊，后面又澄清，不会影响实验把？
2  10%乙醇冲洗，冲洗液一直是浑浊的，是不是不正常啊？
3  各个梯度洗脱的旋成浸膏后是不是要点薄层板后再上硅胶柱？
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有爱就有希望。
1楼2015-03-18 21:47:27
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汴京钱号

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
放空的梦: 金币+20, ★有帮助 2015-03-19 12:19:51
1.刚开始时，冲洗没颜色，是因为你虽然加水了，样品还在柱子里面走，还没出来。后面出来了，就浑浊了。至于你一直说浑浊，如果柱子下面没有漏大孔，那就是正常的。
2你可以通过旋蒸来判断样品梯度的冲洗时间，连续几瓶都没东西了。就换梯度。
3如果你下面对你的样品处理准备通过硅胶柱来分离，那肯定要点板啊。必须的。

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2楼2015-03-19 08:27:41
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jytryh

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
放空的梦: 金币+10, ★有帮助 2015-03-19 12:20:15
1  刚用水冲洗时冲洗液是澄清的，中间浑浊，后面又澄清，不会影响实验。
2  10%乙醇冲洗，冲洗液一直是浑浊的，是不是不正常啊？
如果水洗至无色了，10%乙醇可以跳过。
3  各个梯度洗脱的旋成浸膏后是不是要点薄层板后再上硅胶柱？这是必须的。
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中医药是中华民族一颗璀璨的明珠
3楼2015-03-19 09:10:33
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放空的梦

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 汴京钱号 at 2015-03-19 08:27:41
1.刚开始时，冲洗没颜色，是因为你虽然加水了，样品还在柱子里面走，还没出来。后面出来了，就浑浊了。至于你一直说浑浊，如果柱子下面没有漏大孔，那就是正常的。
2你可以通过旋蒸来判断样品梯度的冲洗时间，连续 ...

我的柱子下面没漏，但是10%乙醇冲的时候，颜色深且浑浊，冲着冲着颜色淡了，但是中间颜色又深了，这个正常吗？前面一个师姐做了也是正丁醇部位，她说她冲下来的是澄清的。
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有爱就有希望。
4楼2015-03-19 12:35:16
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放空的梦

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jytryh at 2015-03-19 09:10:33
1  刚用水冲洗时冲洗液是澄清的，中间浑浊，后面又澄清，不会影响实验。
2  10%乙醇冲洗，冲洗液一直是浑浊的，是不是不正常啊？
如果水洗至无色了，10%乙醇可以跳过。
3  各个梯度洗脱的旋成浸膏后是不是要点薄 ...

我的柱子下面没漏，但是10%乙醇冲的时候，颜色深且浑浊，冲着冲着颜色淡了，但是中间颜色又深了，这个正常吗？前面一个师姐做了也是正丁醇部位，她说她冲下来的是澄清的。
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5楼2015-03-19 12:35:28
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czzlnkar

新虫 (著名写手)
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5楼: Originally posted by 放空的梦 at 2015-03-19 12:35:28
我的柱子下面没漏，但是10%乙醇冲的时候，颜色深且浑浊，冲着冲着颜色淡了，但是中间颜色又深了，这个正常吗？前面一个师姐做了也是正丁醇部位，她说她冲下来的是澄清的。...

你确定上样的时候上匀了吗，有可能你上柱的时候把大孔冲起来了吧
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6楼2015-03-19 13:30:04
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jytryh

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 放空的梦 at 2015-03-19 12:35:28
我的柱子下面没漏，但是10%乙醇冲的时候，颜色深且浑浊，冲着冲着颜色淡了，但是中间颜色又深了，这个正常吗？前面一个师姐做了也是正丁醇部位，她说她冲下来的是澄清的。...

正常情况洗脱开始是浑浊的，但会逐渐变清，颜色也是由深变淡，“冲着冲着颜色淡了，但是中间颜色又深了”有可能树脂装的松紧不一致。还有注意一下树脂再生是否到位。
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中医药是中华民族一颗璀璨的明珠
7楼2015-03-19 14:00:00
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汴京钱号

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
放空的梦: 金币+10 2015-03-20 11:16:52
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4楼: Originally posted by 放空的梦 at 2015-03-19 12:35:16
我的柱子下面没漏，但是10%乙醇冲的时候，颜色深且浑浊，冲着冲着颜色淡了，但是中间颜色又深了，这个正常吗？前面一个师姐做了也是正丁醇部位，她说她冲下来的是澄清的。...

初初的分段，也没什么事，能下来的，自然就能下来，是吧

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8楼2015-03-19 16:30:54
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放空的梦

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 汴京钱号 at 2015-03-19 16:30:54
初初的分段，也没什么事，能下来的，自然就能下来，是吧
...

恩，也是，粗分只要尽量没有损失样品就好。
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有爱就有希望。
9楼2015-03-20 11:16:07
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放空的梦

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by jytryh at 2015-03-19 14:00:00
正常情况洗脱开始是浑浊的，但会逐渐变清，颜色也是由深变淡，“冲着冲着颜色淡了，但是中间颜色又深了”有可能树脂装的松紧不一致。还有注意一下树脂再生是否到位。...

今天打算换下一个梯度的时候，突然颜色又变深了，不知道该怎么办了？
上柱子时候有两点没注意，您帮我看看是不是因为这两个。
1   我用的不是新买的树脂，别人用过得树脂，预处理已经用酸碱各种洗了。
2  上样的时候，90%的样品都溶了，有点没溶的，我当时犯二，直接到进去了。现在冲柱子我都能看见不能溶的样品在向下移动。
如若上述两种情况是造成现在的情况，那我此刻应该怎么办？有什么解决方法？
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有爱就有希望。
10楼2015-03-20 12:26:52
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