应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 免疫亲和柱偶联抗体后无法截获标准品
101/1返回列表
查看: 1096  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

2016zhu

新虫 (初入文坛)

[求助] 免疫亲和柱偶联抗体后无法截获标准品 已有1人参与

我在做农药的免疫亲和柱时，为什么在Sepharose 4B上偶联抗体后，却无法捕获标准品？
    是不是抗体灵敏度太低了，就一定捕获不了标准品么？我的抗体灵敏度是2ppm左右，不管加多少抗体偶联免疫亲和柱，无论用5ppm还是0.5ppm标准品过柱子回收率都和不联抗体的空白柱子一样，这貌似是非特异性吸附吧。难道抗体一点作用都不起么？
    该怎么解决啊，谢谢大家了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-03-15 19:59:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Amanda燕尾蝶

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
2016zhu: 金币+1, 抗体灵敏度低就一定捕获不了么？抗体偶联率很高，每次偶联都会测偶联率的 2015-03-29 16:33:02
抗体灵敏度低有影响。
你确定抗体偶联上胶了吗？
会不会洗脱太过了？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
我自横刀向天笑，笑完我就去睡觉。
2楼2015-03-28 10:51:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Amanda燕尾蝶

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

可以测测抗体偶联率，确定下到底抗体联没连上，连上多少。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
我自横刀向天笑，笑完我就去睡觉。
3楼2015-03-28 10:54:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2016zhu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Amanda燕尾蝶 at 2015-03-28 10:54:03
可以测测抗体偶联率，确定下到底抗体联没连上，连上多少。

抗体偶联率很高，每次都测过。您说会不会是抗体灵敏度太差，就一定捕获不了么？
赞一下 回复此楼
4楼2015-03-29 16:31:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2016zhu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Amanda燕尾蝶 at 2015-03-28 10:54:03
可以测测抗体偶联率，确定下到底抗体联没连上，连上多少。

抗体偶联率都测过，偶联率很高，但是就是捕获不了
赞一下 回复此楼
5楼2015-03-29 16:38:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2016zhu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Amanda燕尾蝶 at 2015-03-28 10:51:37
抗体灵敏度低有影响。
你确定抗体偶联上胶了吗？
会不会洗脱太过了？

抗体灵敏度低就一定捕获不了么？抗体偶联率很高，每次偶联都会测偶联率的
赞一下 回复此楼
6楼2015-03-29 16:38:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Amanda燕尾蝶

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
2016zhu: 金币+1, 谢谢 2015-03-30 08:17:42
引用回帖:
4楼: Originally posted by 2016zhu at 2015-03-29 16:31:52
抗体偶联率很高，每次都测过。您说会不会是抗体灵敏度太差，就一定捕获不了么？...

灵敏度差也不该一点也捕获不了啊。你是怎么确定捕获不了的？不是洗涤过了吗？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
我自横刀向天笑，笑完我就去睡觉。
7楼2015-03-29 21:29:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2016zhu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by Amanda燕尾蝶 at 2015-03-29 21:29:19
灵敏度差也不该一点也捕获不了啊。你是怎么确定捕获不了的？不是洗涤过了吗？
...

就是我用不联抗体的柱子和偶联过抗体的柱子做对比，差别不大，貌似都是材料的非特异性吸附。不管添加多大标准品进行添加回收，最后都是截获1/5左右，怎么洗也洗不干净
赞一下 回复此楼
8楼2015-03-30 08:17:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Amanda燕尾蝶

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
2016zhu: 金币+1 2015-03-31 08:08:15
我能想到的几点原因：1抗体连上胶后影响特异性，连胶的反应体系问题
                              2抗体与标准品反应时的缓冲体系不适合
                             3抗体和标准品反应时间太短，没有孵育完全就被洗掉了
                              4洗杂的时候力度过大，洗涤液可以再优化优化
ps我就做过一点点，不是特别懂。挑着有用的看吧
赞一下 回复此楼
我自横刀向天笑，笑完我就去睡觉。
9楼2015-03-30 09:22:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2016zhu

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by Amanda燕尾蝶 at 2015-03-30 09:22:51
我能想到的几点原因：1抗体连上胶后影响特异性，连胶的反应体系问题
                              2抗体与标准品反应时的缓冲体系不适合
                             3抗体和标准品反应时间太短，没有孵育完全 ...

非常感谢
回复此楼
10楼2015-03-31 08:05:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 2016zhu 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 1rx34o113h 2026-05-23 3/150 2026-05-24 17:41 by 0i3mu4vkjz
[基金申请] 评审有感 +16 popular289 2026-05-18 27/1350 2026-05-24 17:34 by hhs666
[教师之家] 论文撤稿了 +4 bjvtcliu 2026-05-24 7/350 2026-05-24 17:29 by bjvtcliu
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 hvkbtfonbv 2026-05-23 4/200 2026-05-24 17:21 by 75ui6h7z2t
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 hvkbtfonbv 2026-05-23 3/150 2026-05-24 17:01 by 75ui6h7z2t
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 a2tycdlnq1 2026-05-23 5/250 2026-05-24 16:21 by hhx1yx9evi
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 a2tycdlnq1 2026-05-23 4/200 2026-05-24 16:16 by hhx1yx9evi
[基金申请] 河北省自然科学基金 +6 Peterchao 2026-05-18 9/450 2026-05-24 16:02 by 130067131
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 pmo95bazuy 2026-05-23 8/400 2026-05-24 15:56 by 1uy1ht2y9r
[考博] 26/27申博自荐 10+4 ZXW0202 2026-05-22 9/450 2026-05-24 08:47 by bjvtcliu
[基金申请] 青B发送上会通知了吗 +5 chemBioBro 2026-05-22 7/350 2026-05-23 12:35 by zhuifengzhy
[考博] 博士申请 +3 焦晓明 2026-05-21 3/150 2026-05-23 11:26 by mlc840311
[论文投稿] 投稿求助，期刊 +4 希冀，有书读 2026-05-20 8/400 2026-05-22 10:16 by 希冀，有书读
[文学芳草园] 献血感触 +7 呀呀好傻 2026-05-19 13/650 2026-05-21 20:15 by 呀呀好傻
[基金申请] 面上本子正文33页，违规吗？会被低分嘛？ +14 1234567wang 2026-05-17 16/800 2026-05-21 17:58 by 脆脆的饼干
[基金申请] 国自然评分 +4 无名者登山 2026-05-20 5/250 2026-05-21 16:35 by swuq
[基金申请] 国自然上会要求 +7 无名者登山 2026-05-18 11/550 2026-05-21 15:50 by draco1987
[基金申请] 提交了我也来说说感想 +9 fummck 2026-05-20 10/500 2026-05-21 14:17 by draco1987
[考博] 如果工作了想读博，可以边工作边读全日制嘛？ 30+3 铁达火车 2026-05-18 5/250 2026-05-20 09:33 by tfang
[考博] 博士申请 +5 星…… 2026-05-18 6/300 2026-05-18 23:49 by 糊糊涂涂好
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭