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关于耐铅细菌培养基的选择：lb培养基和TMM培养基 已有1人参与
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求助各位大神，自从筛选耐铅的细菌开始就一直被培养基的问题所困扰。。。 LB培养基因为营养成分复杂，加入铅之后，液体中的铅的有效浓度会低于其加入浓度（文献中也多有讨论），而且加入一点点的铅也会有沉淀，呈浑浊的样子。 后来就查了一些文献，发现大家都用TMM培养基（tris buffer 培养基，原始文献是Mergeay, 1985），后来又找了一篇文献，也是引用的TMM培养基，写的比较详细。完全按照文献中的方法配制（灭菌时没有加葡萄糖碳源），加入1mM硝酸铅，还是有沉淀。 关于附件方法中的tris-HCl 6.06g，我是参照了原始文献说tris6.06g加的，然后没有调PH（因为文献里也没有提出来），灭菌，发现PH约9.0，直接加铅有沉淀；用盐酸或者硝酸调ph=7之后，加铅还是有沉淀。 对于绝大部分文献都选用的这个培养基让我折腾这么久还是不行，我也是要崩溃了。。。 跪求各位大神，帮我分析一下原因出在哪里呀。。。。 |
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2015-03-11 09:10:25, 357.96 K
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8楼2015-03-13 09:12:54
2楼2015-03-11 19:09:33
tomjena2015
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- 专业: 环境微生物学
【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
bainaling: 金币+5, ★有帮助 2015-03-11 20:36:39
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bainaling: 金币+5, ★有帮助 2015-03-11 20:36:39
转贴，信息来自Eugeniusz Małkowski (University of Silesia in Katowice), 希望有帮助， Lead is one of the most difficult metal to investigate in laboratory experiments, because it very easily precipitates or forms complex ions. I conducted a large number of experiments with Pb and observed many unique chemical properties of this metal. 1. Effect of pH I observed precipitation of Pb when pH of solutions was higher than 6.1-6.3. I observed this process even if I dissolved in the water only salt of Pb (PbCl2 or Pb(NO3)2, without any other chemical compounds. This precipitation is connected with Hydrolysis and can be easily overlooked if concentration of Pb is lower than 0.5-1.0 mM. Conclusion: If pH of your LB media was above 6.1-6.3. most of Pb could precipitate. If you want to conduct experiments with lead pH of nutrient solutions or any media has to be maximum 5.9-6,0 2. Effect of phosphates Lead very easy and quickly precipitates with phosphates and this reaction is observed irrespective of pH of solution. The product of this precipitation is not Pb3(PO4)2 but different types of pyromorphites, for example Pb5(PO4)3Cl. All pyromorphites are almost insoluble compounds. The formation of pyromorphites is connected with a large drop of pH of nutrient solution or media, which depends on the concentration of Pb salts (a higher concentration of Pb the higher drop of pH) and buffering capacity of solution. Plant physiologist use complete nutrient solutions to grow plants and for a treatment with Pb (one to several days) phosphates are removed from both control solutions and experimental (with Pb) solutions. Conclusion: Use of phosphate buffer in experiments with Pb is not acceptable, because even all Pb can be precipitated. However, it could be possible to use the standard media, but for the time of treatment with Pb phosphates have to be removed from the media. |
3楼2015-03-11 20:11:41
4楼2015-03-11 20:45:28
