| 查看: 818 | 回复: 10 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
playboy723金虫 (正式写手)
|
[交流]
请教：载体怎样连接？
|
||
| 各位高手：请教一个问题，我这几天正在连接一个载体 片段有1500bp 双酶切 两端的酶切位点分别是BamH1和Xho1 我将片段和载体分别酶切、回收后进行连接 （应该切开了 因为同时做的另一个基因连上了） 连接的条件为：片段与载体比例为10：1 根据摩尔浓度算的 然后16度3小时以上 之后转化 结果没有插进去（虽然有阳性克隆 但挑了40多个克隆 都是假阳性和自连） 但同时做的另一个基因700多bp却挑出很多阳性克隆来 所以我想请教一下 ：是否插入的片段越大连接越困难？ >1500bp的片段连接条件是怎样的？ 或者还有其他的要求和问题我没有注意到 请各位高手不吝赐教 我都快烦死了 谢谢了 |
回复此楼» 猜你喜欢
一志愿北化085600材料专硕275|有文章专利｜求调剂
已经有6人回复
-
一志愿华理，数一英一285求A区调剂
已经有12人回复
-
289求调剂
已经有11人回复
-
食品工程专硕一志愿中海洋309求调剂
已经有7人回复
-
生物学学硕，一志愿湖南大学，初试成绩338
已经有6人回复
-
321求调剂
已经有7人回复
-
343求调剂
已经有4人回复
-
305求调剂
已经有3人回复
-
本科新能源科学与工程，一志愿华理能动285求调剂
已经有6人回复
-
332求调剂
已经有3人回复
月月大可
木虫 (著名写手)
- BioEPI: 2
- 应助: 13 (小学生)
- 金币: 3272.1
- 散金: 1393
- 红花: 17
- 帖子: 1674
- 在线: 295.7小时
- 虫号: 549127
- 注册: 2008-04-20
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
8楼2008-06-12 20:36:28
yangym1123
木虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1963.2
- 帖子: 230
- 在线: 30.2小时
- 虫号: 397777
- 注册: 2007-06-10
- 专业: 动物形态学及胚胎学
2楼2008-06-11 19:38:56
3楼2008-06-12 11:53:04
4楼2008-06-12 11:58:38
