| 查看: 809 | 回复: 10 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
playboy723金虫 (正式写手)
|
[交流]
请教：载体怎样连接？
|
||
| 各位高手：请教一个问题，我这几天正在连接一个载体 片段有1500bp 双酶切 两端的酶切位点分别是BamH1和Xho1 我将片段和载体分别酶切、回收后进行连接 （应该切开了 因为同时做的另一个基因连上了） 连接的条件为：片段与载体比例为10：1 根据摩尔浓度算的 然后16度3小时以上 之后转化 结果没有插进去（虽然有阳性克隆 但挑了40多个克隆 都是假阳性和自连） 但同时做的另一个基因700多bp却挑出很多阳性克隆来 所以我想请教一下 ：是否插入的片段越大连接越困难？ >1500bp的片段连接条件是怎样的？ 或者还有其他的要求和问题我没有注意到 请各位高手不吝赐教 我都快烦死了 谢谢了 |
回复此楼» 猜你喜欢
本科新能源科学与工程，一志愿华理能动285求调剂
已经有5人回复
-
一志愿华北电力大学能动专硕，293，求调剂
已经有5人回复
-
调剂310
已经有7人回复
-
食品工程专硕一志愿中海洋309求调剂
已经有6人回复
-
275求调剂
已经有14人回复
-
283求调剂
已经有3人回复
-
085602 化工专硕 338分 求调剂
已经有12人回复
-
312，生物学求调剂
已经有3人回复
-
化学0703 调剂 306分 一志愿211
已经有4人回复
-
311（085601）求调剂
已经有3人回复
3楼2008-06-12 11:53:04
yangym1123
木虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1963.2
- 帖子: 230
- 在线: 30.2小时
- 虫号: 397777
- 注册: 2007-06-10
- 专业: 动物形态学及胚胎学
2楼2008-06-11 19:38:56
4楼2008-06-12 11:58:38
guoqin_shiyin
银虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 0.4
- 散金: 57
- 红花: 3
- 帖子: 876
- 在线: 51.7小时
- 虫号: 163332
- 注册: 2006-01-11
- 性别: MM
- 专业: 微生物
5楼2008-06-12 14:16:11
