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crispr/cas9 菜鸟SOS求助 跪谢！ 已有1人参与
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最近才接触这个新技术 想做基因敲除鼠 但是看的稀里糊涂 想问几个最基础的问题：1.设计sgRNA时要合成2条单链DNA Oligos，请问这两条是分别结合我想要切割的外显子到的两侧，然后将外显子切割掉吗（我之前一直理解为sgRNA是与我目标外显子结合，然就将目标DNA切断的，而不是切割一段序列），为什么那两条单链DNA Oligo是反向互补的？那如果要用CAS9n，那不就得设计四条sgRNA? 2.外显子长度超过250bp，但是张锋实验的sgRNA设计软件要求输入序列不超过250bp，该如何选择？谢谢！感激不尽！ |
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chenguestc
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2楼2015-02-05 14:18:39