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huhuhuz

新虫 (初入文坛)

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虫号: 3672223
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专业: 白血病

[求助] crispr/cas9 菜鸟SOS求助跪谢！已有1人参与

最近才接触这个新技术想做基因敲除鼠但是看的稀里糊涂想问几个最基础的问题：1.设计sgRNA时要合成2条单链DNA Oligos，请问这两条是分别结合我想要切割的外显子到的两侧，然后将外显子切割掉吗（我之前一直理解为sgRNA是与我目标外显子结合，然就将目标DNA切断的，而不是切割一段序列），为什么那两条单链DNA Oligo是反向互补的？那如果要用CAS9n，那不就得设计四条sgRNA? 2.外显子长度超过250bp，但是张锋实验的sgRNA设计软件要求输入序列不超过250bp，该如何选择？谢谢！感激不尽！

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中科院李劲松实验室在Cell Stem Cell发文章揭示CRISPR/Cas9存在脱靶效应已经有19人回复

1楼 2015-02-05 12:49:10

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chenguestc

木虫 (职业作家)

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【答案】应助回帖

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huhuhuz(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-02-05 22:13:05

可以联系电子科技大学生命科学与技术学院的张勇教授，或许他能给你一些帮助，这些软件是他们参与设计的。

赞一下(1人)

2楼2015-02-05 14:18:39

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

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