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huhuhuz

新虫 (初入文坛)

[求助] crispr/cas9 菜鸟SOS求助 跪谢! 已有1人参与

最近才接触这个新技术 想做基因敲除鼠 但是看的稀里糊涂 想问几个最基础的问题:1.设计sgRNA时要合成2条单链DNA Oligos,请问这两条是分别结合我想要切割的外显子到的两侧,然后将外显子切割掉吗(我之前一直理解为sgRNA是与我目标外显子结合,然就将目标DNA切断的,而不是切割一段序列),为什么那两条单链DNA Oligo是反向互补的?那如果要用CAS9n,那不就得设计四条sgRNA? 2.外显子长度超过250bp,但是张锋实验的sgRNA设计软件要求输入序列不超过250bp,该如何选择?谢谢!感激不尽!
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
huhuhuz(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-02-05 22:13:05
可以联系电子科技大学生命科学与技术学院的张勇教授,或许他能给你一些帮助,这些软件是他们参与设计的。
2楼2015-02-05 14:18:39
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