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荧光定量PCR遇到难题-求指点 已有5人参与
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| 最近正在做荧光定量PCR,制作标准曲线时遇到一个问题,试验中,我把我的目的基因与载体连接后导入到感受态大肠菌中,然后液体培养提质粒,质粒DNA为模板进行定性PCR检测目的基因,检测结果为阳性,到这一步也没有问题,可是我把质粒梯度稀释进行上机跑标准曲线时,结果Ct值都在30以后才出来,怕稀释出问题,重新稀释,也降低退火温度都又各做了一次还是同样的效果,头都大了~跪求高手指点! |
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