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求助，taq酶和cobuddy super fidelity dna polymerase 已有2人参与
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我用taq扩1.5kb的基因能扩增出来，用cobuddy酶扩不出来，第一次用cobuddy，难道是体系和pcr的设定有问题？退火温度做的梯度-处理，我的引物tm值是66.3，我从56.3开始做的梯度，一共十个梯度～求那位大神用过cobuddy 求指导～ [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
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【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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普通Taq酶能扩增1.5kb的，而且还扩增出来了，为什么还要用保真酶呢，小于8kb的不建议使用高保真酶，普通Taq酶能扩增出来最好，扩不出来就用热启动酶，好的热启动酶小于10kb都能扩增出来，高保真酶扩增效率差一点，但是保真性较好，如没有特别要求，不建议使用（保真度会将模板，引物降解，导致扩增不成功）。建议http://www.detaibio.com/relia-hotstart-polymerase.html 呵呵 |
4楼2015-01-27 10:19:37