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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 肿瘤药物IC50与细胞信号通路检测
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哈韩小小猪

新虫 (初入文坛)

[交流] 肿瘤药物IC50与细胞信号通路检测 已有2人参与

想检测5FU在肿瘤细胞的IC50，请问一下各位老师，我是不是要先明确一个作用时间，比如48H后检测MTT，如果我要检测药物作用后信号通路的变化，是不是药物作用的浓度就必须为我测定的IC50,同时我想进一步检查药物处理后细胞信号通路的变化,涉及到提取蛋白,我可以在24小时提取蛋白吗,因为怕在48小时细胞死亡增多,这样提取蛋白检测WESTERN后可能不准确。拜托各位老师了
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1楼 2015-01-25 14:38:20
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Klutzl

铁杆木虫 (职业作家)

小喵
★
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你测IC50的时候肯定会设置不同的浓度，然后根据这些浓度下细胞存活率的多少就可以知道药物的lc50了，一般来说，提蛋白的话，我们是设置lc50上下两个浓度来加药的，防止药物效果太好而提不到蛋白，我觉得你可以在36小时的时候提蛋白，因为药物作用于细胞的话，一般要有24小时才能走完一个周期的～你可以看看文献上是怎么说的啦～

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如果我不联系你，你也不联系我，那么，最后，我们是不是都成了陌生人？盛开的蒲公英~~~~~~~~~~~
2楼2015-01-25 15:05:45
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哈韩小小猪

新虫 (初入文坛)
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2楼: Originally posted by Klutzl at 2015-01-25 15:05:45
你测IC50的时候肯定会设置不同的浓度，然后根据这些浓度下细胞存活率的多少就可以知道药物的lc50了，一般来说，提蛋白的话，我们是设置lc50上下两个浓度来加药的，防止药物效果太好而提不到蛋白，我觉得你可以在36小 ...

谢谢老师的帮助，我还想请教下“IC50上下两个浓度”，还包括IC50吗？
另外我看到文献了直接用IC50的浓度处理细胞，但是流式检测细胞凋亡时候细胞的死亡率并没有达到50%？这样写文章时候会不会解释不清楚。
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3楼2015-01-25 20:15:01
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Klutzl

铁杆木虫 (职业作家)

小喵
★
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3楼: Originally posted by 哈韩小小猪 at 2015-01-25 20:15:01
谢谢老师的帮助，我还想请教下“IC50上下两个浓度”，还包括IC50吗？
另外我看到文献了直接用IC50的浓度处理细胞，但是流式检测细胞凋亡时候细胞的死亡率并没有达到50%？这样写文章时候会不会解释不清楚。...

包括你的lc50的浓度，文献上所说的是检测细胞凋亡，万一造成细胞死亡的不是由于凋亡完成的呢，也有可能是因为他们在做流式的时候没有和mtt的时间一致所完成的～其实我也不是特别懂

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4楼2015-01-25 20:26:41
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哈韩小小猪

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Klutzl at 2015-01-25 20:26:41
包括你的lc50的浓度，文献上所说的是检测细胞凋亡，万一造成细胞死亡的不是由于凋亡完成的呢，也有可能是因为他们在做流式的时候没有和mtt的时间一致所完成的～其实我也不是特别懂
...

谢谢啦
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5楼2015-01-25 20:30:04
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a238886

禁虫 (著名写手)
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6楼2015-01-25 22:22:37
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哈韩小小猪

新虫 (初入文坛)
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6楼: Originally posted by a238886 at 2015-01-25 22:22:37
  测IC50 你要设置时间  一般 要24h  也有人做48h的~~

我打算设定48h，因为我想在后期检测药物对细胞周期的影响，这样就可以检测24小时或36小时后细胞周期的变化同时细胞凋亡又不算太多
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7楼2015-01-26 09:19:59
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