应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助PCR扩增不出来的问题.....
232/3返回列表上一页123下一页
查看: 2450  |  回复: 22
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

jennymxz

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主是否做了阳性、阴性对照？结果怎么样？
赞一下 回复此楼
11楼2015-01-25 17:46:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芕星悦

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by qsy1115 at 2015-01-25 17:05:01
单独跑下模板试试，看是否模板讲解，一般taq酶去扩应该都没啥问题的

你说的单独跑下模板是什么意思？就是利用胶检测DNA吧？
赞一下 回复此楼
12楼2015-02-02 10:24:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芕星悦

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 水无月小白 at 2015-01-23 09:29:35
只能说可能是水的问题了 而且 是不是有可能是因为模板浓度太高 导致效率过低

20ul体系中，DNA浓度为30ng，高么？在国内的时候，我直接用的DNA母液，浓度一般在50ng/ul-100ng/ul，20ul体系中用2ul，那个跑的完全没问题。
赞一下 回复此楼
13楼2015-02-02 10:26:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芕星悦

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 水无月小白 at 2015-01-23 09:29:35
只能说可能是水的问题了 而且 是不是有可能是因为模板浓度太高 导致效率过低

感觉像是两次过滤的水，不知道算不算去离子水。是不是可以利用电导仪来测一下水的离子浓度，如果基本为0，就说明水没问题了？
赞一下 回复此楼
14楼2015-02-02 10:29:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芕星悦

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 立林258369 at 2015-01-23 00:25:30
可以尝试将酶含量提高，加大模板量到100ng。预混的也是这些，可以参考一下它的配比

你们用后染色法么？琼脂糖凝胶，利用后染色法（EB为核酸染料），总感觉染色效果也不太好。你们那里用什么染色？
赞一下 回复此楼
15楼2015-02-02 10:32:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

本帖仅楼主可见
赞一下
16楼2015-02-02 12:06:43
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

浅语8905

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

知道是什么原因了吗？
赞一下 回复此楼
17楼2015-02-02 12:34:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芕星悦

新虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 浅语8905 at 2015-02-02 12:34:11
知道是什么原因了吗？

还不清楚，有点消极了。买了新的mix和Taq，结果还是不稳定，只跑出来一次，效果也不好。打算从水着手调查了。
赞一下 回复此楼
18楼2015-02-02 22:39:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

浅语8905

新虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 芕星悦 at 2015-02-02 22:39:50
还不清楚，有点消极了。买了新的mix和Taq，结果还是不稳定，只跑出来一次，效果也不好。打算从水着手调查了。...

尽然跑出来过，那是不是PCR仪的问题呢，你可以试试换个仪器试试，多做对照
赞一下 回复此楼
19楼2015-02-03 08:53:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leannele

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

加大dntp的量，使用镁离子和buffer分开的缓冲液，模板不要加很多。
赞一下 回复此楼
20楼2015-02-03 14:56:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 芕星悦 的主题更新
232/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:39 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:17 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 06:22 by ZPa0EcMwuECS
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 06:13 by ZPa0EcMwuECS
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 05:51 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 国社科申报系统有变化 +3 kynobel 2026-08-23 3/150 2026-08-29 21:57 by 余韵清
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +4 tannykie 2026-08-29 4/200 2026-08-29 17:14 by lmz0216
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +5 gdd2018 2026-08-28 10/500 2026-08-29 14:10 by Jacob678
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭