应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 定量PCR
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
182/2返回列表上一页12
查看: 1449  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

悠悠飘杨

新虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 懒蛋 at 2015-01-16 00:47:46
Nice melting curve.

For no stationary phase:

1. Increase PCR cycle
2. Decrease sample dilution. Are you working with cDNA/gDNA/plasmid/RNA/PCR fragment as template?
3. You said if you increa ...

我的样品没有稀释过，样品的浓度本身就很低，我用的是DNA，公司里的技术支持跟我说，如果超过35个循环，在35至40个循环内，很有可能出现非特异性扩增，这时候只要减少循环数，就可以解除这种现象，而且老师也不建议循环数过高的定量PCR。
赞一下 回复此楼
11楼2015-01-16 08:59:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dqtianbin

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
12楼2015-01-18 21:11:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ivirus

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

不知道你用的是那个公司的KIT，不过推荐天根的一个叫qRT-一步法...什么的，记不大清楚了。我当时用过，感觉还好，阳性样起峰还OK
赞一下 回复此楼
奔三的年纪 想换个环境
13楼2015-01-18 21:34:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangchj03

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
悠悠飘杨: 金币+5, ★有帮助 2015-01-22 08:53:12
提一些改进建议：第一，增加模板加入的量，第二扩大反应体系；第三；增加5个循环，不要担心引物二聚体的出现，根据你的结果来看，顶多是阴性对照出现二聚体，只要你的样本没有出现双峰就没问题；第四；添加一些DMSO等增强剂（也能改善引物二聚体情况），注意同时增加引物加入量；第五，采用好一点的试剂盒。祝好
赞一下 回复此楼
14楼2015-01-21 11:54:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangchj03

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by 悠悠飘杨 at 2015-01-16 08:59:41
我的样品没有稀释过，样品的浓度本身就很低，我用的是DNA，公司里的技术支持跟我说，如果超过35个循环，在35至40个循环内，很有可能出现非特异性扩增，这时候只要减少循环数，就可以解除这种现象，而且老师也不建议 ...

只要你的样本扩增没有引物二聚体情况，数据就可靠，不要担心这个问题，改进的方法有很多种，参考我给你的意见
赞一下 回复此楼
15楼2015-01-21 11:55:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

先考虑引物与模板，其次可能和反应体系中其他试剂有关吧，
是Taq酶或是（热启动Taq酶），
赞一下 回复此楼
todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
16楼2015-01-21 15:04:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

追求梦的人

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

多增加循环数吧，刚起来就完了，我也是平时多设循环数就好

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
艰难困苦玉汝于成
17楼2015-01-21 15:37:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

txing

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

浓度低，循环圈数少
赞一下 回复此楼
18楼2015-01-21 16:29:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 悠悠飘杨 的主题更新
182/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 292分，材料与化工，申请调剂 +18 程晴之 2026-04-01 20/1000 2026-04-01 23:01 by 来看流星雨10
[考研] 285求调剂 +11 AZMK 2026-04-01 11/550 2026-04-01 22:40 by peike
[考研] 085602化学工程268分蹲调剂 +8 月照花林。 2026-04-01 8/400 2026-04-01 22:08 by 无际的草原
[考研] 重庆大学材料与化工085600，初试370+，求求调剂建议 +3 shzhou_ 2026-04-01 3/150 2026-04-01 20:41 by 无懈可击111
[考研] 349求调剂 +6 吃的不少 2026-04-01 6/300 2026-04-01 17:55 by JYD2011
[考研] 348求调剂 +5 小懒虫不懒了 2026-03-27 6/300 2026-04-01 16:13 by yanflower7133
[考研] 求调剂 +5 零八# 2026-03-27 5/250 2026-04-01 14:40 by yulian1987
[考研] 086000生物与医药298调剂求助 +4 元元青青 2026-03-31 6/300 2026-04-01 11:13 by syh9288
[考研] 352分-085602-一志愿985 +6 海纳百川Ly 2026-03-29 6/300 2026-03-31 21:06 by yuq
[考研] 材料工程085601数二英一335求调剂 +5 双马尾痞老板2 2026-03-31 5/250 2026-03-31 19:07 by Wang200018
[考研] 085601 329分调剂 +6 yzsa12 2026-03-31 6/300 2026-03-31 15:23 by yanflower7133
[考研] 287求调剂 +17 land xuxu 2026-03-26 17/850 2026-03-31 11:16 by Zzxxxs
[考研] 材料专硕 085600求调剂 +7 BBQ233 2026-03-30 7/350 2026-03-30 17:44 by oooqiao
[考研] 环境科学与工程334分求调剂 +6 王一一依依 2026-03-30 8/400 2026-03-30 11:52 by yjolah
[考研] 296求调剂 +10 彼岸t 2026-03-29 10/500 2026-03-30 10:50 by 探123
[考研] 295求调剂 +5 wei-5 2026-03-26 5/250 2026-03-30 08:34 by 探123
[考研] 一志愿北京理工大学本科211材料工程294求调剂 +8 mikasa的围巾 2026-03-28 8/400 2026-03-29 12:48 by 无际的草原
[考研] 调剂考研 +3 王杰一 2026-03-29 3/150 2026-03-29 08:09 by fmesaito
[考研] 330一志愿中国海洋大学 化学工程 085602 有读博意愿 求调剂 +3 wywy.. 2026-03-27 4/200 2026-03-28 03:32 by fmesaito
[考研] 285求调剂 +4 AZMK 2026-03-27 7/350 2026-03-27 20:59 by AZMK
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭