| 查看: 1935 | 回复: 4 | |||
[交流]
植物组织培养细节很重要 已有4人参与
|
|
植物组织培养是高中生物新课标实验中的重要实验，通过组培，能提高学生实践动手能力、科学实验能力、技术推广能力等，也是学生最想动手操作的一个实验。但许多老师和同学组组培操作过程中因为一些细节问题的疏忽，最终导致实验未能成功。下面为大家总结组培过程中的注意事项。 1. 培养基的配制 植物组织培养最常用的培养基为MS培养基，其中包含几十种化合物，在配制培养基时切忌“一锅煮”，就是不能将各种化合物一齐添加进去，因为有些化合物相遇会发生化学反应产生沉淀，影响培养基的营养成分，因此，一定要等到一种成分溶解之后，再缓慢的添加另一种成分，使其成为均一、无沉淀的培养基。 另外，培养基的pH值会对培养基的硬度造成影响。若将培养基的pH调的过高，则会使培养基变硬，进而增加了接种的阻力，从而对外植体造成损伤。若将培养基的pH值调的过低，则会使培养基不能凝固，起不到固定外植体的作用。因此，将培养基的pH调节至6.0即可。 2. 外植体的选择 为了使接种后的诱导得以成功，选择的外植体应该是幼嫩的、处于生长旺盛时期的。而且选择的外植体的体积不能过小，如若过小则会影响愈伤组织的形成，从而影响进一步的分化。因此，一般接种的外植体体积在0.5~1.0cm2的范围内即可。 3. 消毒 外植体的消毒主要分为两个阶段。首先是初次消毒，先用流水冲洗，然后用洗衣粉水进行刷洗，以去除表面的污垢，最后用流水冲洗20min，完成第一次的消毒。接下来的消毒步骤要在超净工作台中进行，在各种消毒剂中升汞的杀菌效果最好，但由于其中含有重金属，且实验后的收集工作不易，因此在中学实验中不推荐使用升汞。采用酒精消毒30s，2%~10%的次氯酸钠消毒8~10min即可达到同样的消毒效果。 4. 接种 首先，点燃酒精灯，用酒精棉球擦拭双手，再擦拭实验用到的器械，然后在火焰上反复灼烧，放置一旁待到器械温度不高时方可用其进行操作，以免将外植体烫伤。操作过程中，避免双手在培养皿上方来回通过造成外植体的污染，可以在每次修剪完外植体后将培养皿的盖子盖上，以降低污染率。接种前，要将培养基的瓶盖在火焰上迅速灼烧(由于目前大部分学校都在使用塑料组培瓶，因此一定要迅速通过火焰，以防损坏组培瓶)，方可进行接种。 5. 培养 接种好的培养瓶放置于光照培养架上，每天给予10h的光照即可满足外植体分化对光照的需求。 6. 炼苗与移栽 待到无菌苗长至组培瓶的瓶口时即可进行移栽，如若不移栽，则会影响植株的进一步生长，最终导致植株的死亡。移栽之前，首先要对组培苗进行炼苗，具体做法为先闭瓶锻炼3d，再开瓶锻炼3d，以培养基上开始长菌为移栽的标准。 移栽前，一定要将根部的培养基洗净，如若没有洗净，在种植于土壤中时，培养基的营养成分会加剧土壤微生物的生长，降低组培苗的移栽成活率。为了提高组培苗的成活率，可先在灭过菌的珍珠岩或蛭石上培养使根系发达再转移到土壤中。 植物组织培养并不像您想象中的那么困难，只要在整个操作过程中注意到每个细节，一定会收获到成功的喜悦! |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有6人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有6人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有5人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有6人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有8人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有6人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有9人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有8人回复
-
国自然面上复盘~欢迎讨论
已经有15人回复
-
中青基了要发朋友圈吗？
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 做植物组织培养 刚入门比较愚钝，请大家赐教哈！
已经有5人回复
- 实验室长期做植物组培试验，对人体会产生很大的危害吗？？？
已经有4人回复
- 植物愈伤组织培养
已经有7人回复
- 植物组培苗的炼苗
已经有4人回复
- 组织培养 求助
已经有8人回复
- 植物组织培养对人的安全性如何
已经有10人回复
- 请大家谈谈，植物组培的发展前景如何？
已经有9人回复
- 做组织培养诱导不出愈伤组织
已经有18人回复
- 植物组织培养方面的实验操作经验总结
已经有7人回复
- 请问，植物组织培养的文章，有什么SCI期刊可以发，谢谢
已经有4人回复
- 植物组织培养中需要注意哪些问题？
已经有3人回复
- 【求助/交流】怎样创建植物组织培养的无菌环境
已经有23人回复
- 超经典植物组织培养外文书籍——Plant_Tissue_Culture_Engineering【已搜索无重复）
已经有40人回复
2楼2016-04-21 18:42:48
 |
3楼2016-07-19 19:29:54
4楼2016-07-28 15:18:24
5楼2021-10-11 17:15:19
30