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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 有关western blot 的问题
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searush

铜虫 (初入文坛)

[求助] 有关western blot 的问题 已有2人参与

请问下  我做的是NF-KB p65的抗体  显影结果怎么会在目的带中出现两条带呢？求解

有关western blot  的问题
IMG_20150112_170521.jpg
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学术研究
1楼 2015-01-12 17:06:47
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by searush at 2015-01-14 13:41:11
谢谢，我想问下会不会是蛋白在电泳过程中，到分离胶时目的蛋白没有到同一水平线上，有一部分是在后面造成的。...

有这种可能，但是一般如果不是上两次样的话，这种可能性是非常小的。我做SDS PAGE的时候有时候上样量大 会分两次上，可能会出现双条带这种情况。还有就是你在跑胶的时候如果电压突然改变幅度较大的话，也可能会出现双条带，有时和胶也有关系，原因多种多样，呵呵，解决了就行，当做是一次交流！
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
14楼2015-01-14 14:33:11
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searush

铜虫 (初入文坛)
自己顶一个  希望 大虫们指教
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学术研究
2楼2015-01-12 17:09:35
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molizerd

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
searush(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-01-14 20:04:55
这是压片曝光的还是显色的还是机器曝光的？
如果是压片的话是因为你压的胶片动了。其他的你这个是单抗还是多抗？

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2015-01-12 17:33:29
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
searush(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-01-14 20:05:07
除了楼上说的原因之外，还有就是你在进行PAGE的时候，是一次上样还是两次上样呢，如果是两次上样的话，也会产生这种结果的。整个实验是没什么问题的。
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
4楼2015-01-12 17:37:32
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