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ladypapa

新虫 (初入文坛)

[求助] 紫外分光光度法中的标准曲线制备和供试品制备 已有2人参与

实验做到一半了,才想起一个致命的问题
我是做总黄酮的提取工艺研究的,在开始时是用了0.0052g的芦丁对照品,稀释至50ml,制成了104ug/ml的对照品溶液,取对照品溶液0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml分别置于10ml量瓶中,各加1%三氯化铝2ml,用60%乙醇定容至刻度,绘制出标准曲线

然后~重点是~我们的供试品测定时这样做的
取1g药材粉末,加50ml60%的乙醇,超声提取两次,每次40min,过滤,滤液合并,取1ml滤液于25ml容量瓶中,加1%三氯化铝2ml,用60%乙醇定容至刻度,测定其吸光度

做标准曲线的时候我们是在10ml容量瓶中定量的,在样品测定中我们使用25ml容量瓶来定容的,这样可信吗?之前试过把样品的滤液取1ml在10ml容量瓶中,测出的吸光度太大了,超出标准曲线,后来改了在25ml容量瓶中定容,测出的刚刚好~~可是,现在纠结了,可以这样的吗?看了好多文献,供试品的制备最后都是按标准曲线项下制备,可是我们的完全不同~求各位指教!!谢谢了!!
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ladypapa

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 药药 at 2015-01-07 20:31:13
两个50ML出来不到100吧,你先加60%乙醇到100,吸光度高了,加到200,然后取1ML

不懂你的意思~我的问题是问我的供试品测定和标准曲线的制备的稀释倍数不一样,这样还能不能做下去~~~~
4楼2015-01-07 21:16:26
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药药

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1g药材浸出液多少?这个不得先确定吗!

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-01-07 20:27:25
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药药

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

两个50ML出来不到100吧,你先加60%乙醇到100,吸光度高了,加到200,然后取1ML

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2015-01-07 20:31:13
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duliuhui

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
稀释倍数不同不影响测定,前处理方法、溶剂一致就OK了,稀释倍数你在计算时代入计算结果即可。
确保供试的吸光度在标曲范围内即可。
5楼2015-01-08 08:42:02
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