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想配置浓度为50mg/ml的利福平母液用于摇农杆菌(按1:1000加入),参考网上的方法:称取2.5gRif于50ml管中,加40ml甲醇定容至50ml,可以涡旋,加入NaOH助溶。想问的是:1、2.5g利福平是很大的量,进口的一小瓶也就1点多克,需要两小瓶(按比例缩小用量先不说,网上既然说的是2.5g就说明有人这么做过) 2、加甲醇后定容是用水么? 3、涡旋有什么条件要求么? 4、 加了2M NaOH 后是继续涡旋还是采取什么方法,因为溶解的并不好,在抽滤灭菌时发现大部分利福平都沉淀不溶 5、抽滤灭菌时大概过滤多少就需要更换滤膜,做了几次都是会弄一身红点,是场灾难。 用这种方法配的利福平加入LB里颜色变化并不明显,而且摇到理想浓度时溶液颜色并不是橙色,就像是被大肠污染了那种黄色。配个利福平就遇到诸多困难,望大家赐教,拜谢 |
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2楼2015-01-05 16:06:01
Esther_Young
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